Установлено, что вакцинация цыплят против цыплят ИББ на фоне экспериментального хронического сочетанного микотоксикоза вызывает существенные гистологические изменения в щитовидной железе. Применение антиоксиданта митофена уменьшает тяжесть дистрофических и альтернативных процессов в тироцитах, способствует более ранней регенерации паренхимы железы.
Ключевые слова:антиоксидант, цыплята, щитовидная железа, вакцинация, инфекционная бурсальная болезнь, микотоксины.
Поддержание гомеостаза в неблагоприятных условиях внешней среды осуществляется взаимодействием нейроэндокринной и иммунной систем. Несмотря на большое количество работ по изучению эндокринных желез, в частности щитовидной железы, в различных экстремальных условиях, их исследование при моделировании ситуаций, в которых бы использовались повреждающие факторы, не утратили своей актуальности [1, 2, 3]. Это связано с тем, что щитовидная железа опосредует развитие неспецифических реакций организма на стрессовые воздействия, какими могут являться влияние вакцинных антигенов. Кроме того, изучение морфофункционального состояния щитовидной железы имеет важное значение для раскрытия характера ответных реакций организма.
Цель работы –изучить влияние антиоксидантного препарата митофена на морфологию щитовидной железы цыплят, вакцинированных против инфекционной бурсальной болезни (ИББ) на фоне экспериментального хронического сочетанного микотоксикоза.
Из числа экспериментальных животных сформированы 5 групп по20 птиц в каждой. Цыплят 1 группы иммунизировали против ИББ на фоне применения митофена и комбикорма, естественно контаминированного токсинами грибов. Митофен применяли цыплятам в период с 8 по 22 день жизни. Митофен вводили ежедневно, перорально, с водой в дозе 50 мг/кг живой массы. В 15 и 22-дневном возрасте цыплят данной группы иммунизировали против ИББ вирус-вакциной из шт. “Винтерфильд 2512”. Вакцину применяли согласно Инструкции по ее применению, перорально, 2-кратно. Птицу 2 и 3 групп также в 15 и 22-дневном возрасте иммунизировали вакциной без применения антиоксиданта. Цыплятам 2 группы также скармливали комбикорм, загрязненный микотоксинами. Птице 3 группы задавали комбикорма, не загрязненные микотоксинами. Цыплятам 4 группы скармливали комбикорм, пораженный токсинами грибов. Птице 5 группы скармливали комбикорм, не контаминированный микотоксинами. Иммунизацию цыплят 4 и 5 групп против ИББ не проводили, митофен не применяли.
На 7 день после первой, 7 и 14 дни после второй вакцинации по 4-5 птиц из каждой группы убивали. Кусочки щитовидной железы фиксировали в 10%-ном растворе формалина, подвергали обезвоживанию и инфильтрации парафином. Гистологические срезы готовили на санном микротоме. После депарафинирования гистосрезов их окрашивали гематоксилин-эозином и микроскопировали. Полученные данные документированы микрофотографированием с использованием цифровой камеры «ДСМ-510», а также программного обеспечения по вводу и предобработке изображения «ScopePhoto».
При исследовании щитовидной железы 22-дневных интактных цыплят 5 группы (в сроки на 7 день после 1 вакцинации против ИББ) установлено, что орган характеризовался некоторыми особенностями стромальных и паренхиматозных структур: толщина соединительнотканной капсулы составляла 40-42 мкм, волокна в ней располагались параллельно, ядра фиброцитов четко структурированы. В отдельных участках капсулы находилось значительное количество жировой ткани. От капсулы отходили тонкие внутриорганные прослойки. В паренхиме органа преобладали фолликулы среднего размера. Тироциты кубической формы, ядра их округлые, расположены в центре клетки. Резорбция тиреоглобулина проявлялась в виде вакуолей, преимущественно в пограничных с эндокриноцитами областях. Мелкие фолликулы располагались в основном на периферической части органа, группами по 10-12 штук. Интерфолликулярные эпителиоциты располагались повсеместно по всей паренхиме в виде округлых образований и имели диаметр 69,30±0,74 мкм. На 7 день после 2 вакцинации против ИББ (29-дневный возраст) отмечено увеличение диаметра фолликулов. Мелкие фолликулы располагались поодиночке в центральной части органа, а на периферических участках они формировали скопления из 4-5 фолликулов. Резорбция тиреоглобулина активная. На 14 день после 2 вакцинации (36-дневный возраст) толщина капсулы железы увеличивалась до 45-47 мкм. Волокна, расположенные снаружи, плотно прилегали друг к другу. В более глубоких ее слоях обнаруживалось некоторое разрыхление волокнистых структур. Соотношение фолликулов разного диаметра существенно не изменялось. Незначительно увеличивалась высота тироцитов и их ядер.
Введение вакцинных антигенов и микотоксинов вызывало значительнуюперестройку главных компонентов железы, проявляющуюся в повышенной функциональной напряженности клеток, относительно быстром расходовании их жизненных ресурсов, последующем развитии дистрофических изменений, приводящих к преждевременному отмиранию тироцитов, а иногда и разрушению фолликулов.
В щитовидной железе 22-суточных цыплят 1 группы средний диаметр фолликулов составлял 112,10±0,90 мкм. Преобладали структуры среднего диаметра. Также выявлялось много мелких фолликулов, располагающихся большими группами по 15-17 штук между фолликулами среднего размера и интерфолликулярных островков диаметром 86,40±0,34 мкм. В органе 29-суточных цыплят отмечалось незначительное увеличение крупных фолликулов и резкое снижение мелких. Группы мелких фолликулов повсеместно располагались по всей паренхиме органа. Каждая группа включала 10 очень мелких структур - 23,40±0,80 мкм. В строме отмечалось увеличение густоты сосудов микроциркуляторного русла, особенно ярко выраженных в зонах расположения мелких групп фолликулов и интерфолликулярных островков. У 36-суточных цыплят 1 группы установлено значительное увеличение количества стромальных компонентов – толщина капсулы составила 98,8±0,76 мкм с рыхло расположенными волокнами, между которыми залегали жировые скопления. Крупные редкие фолликулы располагались по периферии органа. Процентное соотношение мелких фолликулов существенно возрастало. Располагались они чаще по периферии по 5-6 штук в группе. Отмечалась усиленная васкуляризация органа, как в стромальных, так и в паренхиматозных элементах.
В щитовидной железе 22-дневных цыплят 2 группы под влиянием микотоксинов и вакцинного антигена происходило увеличение диаметра фолликулов и смещение процентного соотношения в сторону крупных. Стенка фолликулов сформирована клетками плоской формы с уплощенным ядром. Мелкие фолликулы располагались небольшими группами по 5-6 штук. Средний диаметр фолликула составлял 108,40±0,63 мкм, пиноцитозные пузырьки их коллоида находились исключительно на периферических участках. У 29-дневной птицы в паренхиме железы отмечено скачкообразное увеличение среднего диаметра фолликулов, так как в процентном выражении количество крупных структур возросло, а мелких снизилось. Последние располагались небольшими группами (3-4 штуки) между фолликулами среднего диаметра или поодиночке. У краев органа обнаруживалось преобладание средних и укрупненных фолликулов, иногда удлиненно неправильной формы с гомогенным плотным содержимым, а в центральной зоне – достаточное количество мелких и средних с вакуолизированным коллоидом, занимающим центральное положение. Наряду с тироцитами кубической формы выявлялись и уплощенные клетки. В 29-дневном возрасте отмечалась относительная нормализация функциональной активности. Показатель среднего диметра фолликулов приближался к физиологической норме. Однако число мелких фолликулов достаточно высокое, что свидетельствует о некотором функциональном напряжении органа.
У 22-дневной вакцинированной птицы 3 группы стромальные компоненты железы представлены достаточно широкой капсулой 115,6±1,4 мкм, волокна в которой расположены рыхло, у наружной части находились небольшие скопления липоцитов. Межфолликулярные соединительнотканные прослойки содержали хорошо выраженные сосудистые структуры: артерии со средним диаметром – 48,6±0,6 мкм, с ярко выраженной медией и вены диаметром 53,6±0,8 мкм. Крупные структуры диаметром 163,5±1,4 мкм занимали периферическую часть органа. Они имели слегка вытянутую форму, тироциты плоские, коллоид интенсивно окрашен. Фолликулы малого и среднего диаметров занимали в органе центральное положение. Мелкие фолликулы диаметром 12,2±0,6 мкм расположены небольшими группами (6-7 штук). Стенка фолликулов среднего диаметра состояла из кубических тироцитов высотой 16,7±0,6 мкм, диаметр их ядер составлял 7,4±0,3 мкм. Между фолликулами расположены интерфолликулярные островки – источники развития новых фолликулов. Они имели либо округлую форму, со средним диаметром 75,2±1,1 мкм, либо расположены в виде нешироких тяжей.
В органе 29-суточных цыплят 3 группы ширина капсулы железы возрастала до 129,9±1,5 мкм. Пучки волокон расположены параллельно друг другу, между ними находились скопления жировых клеток. В капсуле расположены довольно крупные кровеносные сосуды – вены со средним диаметром 210,6±1,7 мкм и артерии 180,4±0,9 мкм. Средний диаметр фолликулов составлял 152,5±1,3 мкм. Крупные фолликулы занимали как центральную, так и периферическую части органа. Мелкие фолликулы диаметром 28-30 мкм небольшими группами (3-4 штуки) или в виде тяжей занимали периферическую часть органа. Редкие одиночные интерфолликулярные островки диаметром126,5±0,8 мкм расположены в центральной части паренхимы. Крупные фолликулы, занимающие центральную часть органа, имели вытянутую или изогнутую форму. На 36 день опыта у цыплят 3 группы капсула была шириной 120,4±1,6 мкм. Во внутренней и наружной частях капсулы имелись интенсивно окрашенные, плотно прилегающие волокна. Между соединительнотканными элементами располагалась достаточно широкая полоса жировой ткани. Средний диаметр фолликулов составлял 141,4±0,9 мкм. Тироциты кубической или призматической формы, высотой 17,9±0,16 мкм, их ядра диаметром 8,4±0,14 мкм, чаще округлой формы, занимали центральное положение. Незначительное количество мелких фолликулов, средний диаметр которых составлял 36,5±1,2 мкм, расположены группами (2-3 штуки) под капсулой. Фолликулы среднего диаметра располагались повсеместно, а крупные локализовались в периферической части паренхимы.
В 22-дневном возрасте паренхима щитовидной железы цыплят 4 группы, получавшей корм с микотоксинами, представлена в основном фолликулами среднего диаметра, имеющими правильную округлую форму. Тироциты кубические, коллоид характеризовался высокой степенью пиноцитозной активности. Мелкие фолликулы формировали своеобразные тяжи, расположенные между структурами крупного диаметра. Некоторые крупные фолликулы имели вытянутую форму, их размеры соответствовали 162,5±1,1 мкм. Процентное соотношение крупных и мелких фолликулов относительно равноценное. Количество крупных фолликулов резко увеличилось к 29 дню исследования. Диаметр крупных фолликулов составил 250,6±1,5 мкм. Наиболее крупные структуры имели многогранную форму, внешне очень схожую с долькой печени. Тироциты плоской формы, высотой 9,9±0,6 мкм, ядро палочковидное – 4,8±0,3 мкм. Средние фолликулы имели диаметр 136,6±1,2 мкм. Пиноцитозная активность обнаруживалась как на периферических участках фолликулов у апикальных полюсов тироцитов, так и в центральной части. Мелких фолликулов мало и расположены они на периферии. Капсула органа тонкая – 24,5±2,1 мкм. На некоторых ее участках фрагментарно находились достаточно широкие участки жировой ткани. В органе 36-суточных цыплят 4 группы диаметр крупных фолликулов существенно не менялся, однако выявлялось увеличение их численности. Крупные фолликулы занимали в основном подкапсулярное пространство. Центральную часть паренхимы занимали фолликулы среднего диаметра и небольшие группы мелких фолликулов.
Таким образом, вакцинация цыплят против ИББ на фоне экспериментального хронического сочетанного микотоксикоза вызывает значительную структурную перестройку главных компонентов щитовидной железы. Митофен, применяемый совместно с вакциной на фоне скармливания микотоксинов, уменьшает тяжесть дистрофических и альтеративных процессов в тироцитах, способствует более ранней регенерации паренхимы железы.
Литература:
- Влияние иммунизации кур на микроморфологию их щитовидной железы / Б.Я. Бирман, И.Н. Громов, Ф.Д. Гуков, И.В. Клименкова // Эпизоотология, иммунобиология, фармакология и санитария. - 2006. - №1. – С. 32-35.
- Гуков, Ф.Д. Реактивные изменения щитовидной железы кур под влиянием вакцинных антигенов / Ф.Д. Гуков, И.Н. Громов, И.В. Клименкова // Ученые записки УО ВГАВМ. – Витебск, 2006. – Т.42, вып.1, ч.1. – С. 53-55.
- Клименкова, И.В. Онтогенетические корреляции фолликулярного и нейрососудистого аппаратов щитовидной железы гусей / И.В. Клименкова, Ф.Д. Гуков, И.Н. Громов // Сельское хозяйство – проблемы и перспективы : сб. науч. тр. : Т.2 / под ред. В.К. Пестиса. – Гродно : ГГАУ, 2010. – С. 258-265.
