Морфофункциональные особенности строения печени новорожденных норчат различных окрасочных генотипов
Исакова Марина Борисовна, аспирант;
Распутина Ольга Викторовна, доктор ветеринарных наук, доцент, профессор
Новосибирский государственный аграрный университет
Изучено гистологическое строение печени у новорожденных норчат американской норки окрасочных генотипов Standard (+/+ +/+), Sapphire (a/a p/p), Lavender (a/a m/m). Отмечены общие характеристики структуры печени для норок в возрасте 1 сутки.
Ключевые слова: норка американская, гепатоциты, желчный проток, пролиферация, эозинофильные нормобласты, мегакариоциты, ядерно-цитоплазматическое соотношение.
Печень является центральным органом гомеостаза; она самая крупная полифункциональная застенная железа пищеварительного тракта. Функции печени чрезвычайно разнообразны: принимает участие в процессах пищеварения, секретирует желчь, синтезирует белки плазмы крови, образует и накапливает гликоген, участвует в обмене холестерина, витаминов, гормонов и ферментов, является депо ряда микроэлементов, у новорожденных животных выполняет функцию кроветворения. Также печень защищает организм от патологических микроорганизмов и чужеродных веществ, поступающих из кишечника в кровь, обезвреживает многие вредные продукты промежуточного и конечного обмена веществ, инактивирует гормоны, биогенные амины, лекарственные препараты [1,3,4].
При изучении литературных источников сведения о морфологии печени американских норок в возрастном и генотипическом аспекте малочисленны.
В связи с этим необходимы знания закономерностей структурной организации печени у новорожденных норчат различных окрасочных генотипов, что будет способствовать выяснению механизмов, обеспечивающих прогрессивное и регрессивное развитие печени [3].
Цель исследования:изучить морфологические особенности печени американской норки генотипов Standard (+/+ +/+), Sapphire (a/a p/p), Lavender (a/a m/m) в возрасте 1 сутки.
Исследование проводилось на экспериментальной звероферме Института цитологии и генетики СО РАН (ЦКП Генофонды пушных и сельскохозяйственных животных), кафедре акушерства, анатомии и гистологии ФГБОУ ВО Новосибирский ГАУ.
В опыте использовали норок в возрасте 1 сутки генотипов Standard (+/+ +/+), Sapphire (a/a p/p), Lavender (a/a m/m).
Для изучения морфологических особенностей печени проводили эвтаназию животных (по 3 гол каждого генотипа). При вскрытии обращали внимание на топографию печени, определяли её абсолютную и относительную массу. Материал обрабатывали методом классической гистологии. Парафиновые блоки нарезали на санном микротоме. Срезы окрашивали гематоксилин-эозином. Гистологическое строение печени изучали при помощи микроскопа Carl Zeiss Primo Star. Морфометрические исследования проводили в программе Zeiss Efficient Navigation (ZEN). Определяли площадь гепатоцита, площадь ядра и ядерно-цитоплазматическое соотношение (Я/Ц).
Обработку цифрового материала осуществляли методом вариационной статистики, с использованием стандартной программы Microsoft Excel. Достоверность различий сравниваемых величин определяли по t-критерию Стьюдента.
Результаты исследования. При изучении топографии печень у норок расположена в брюшной полости позади диафрагмы. На поверхности долей имеются вдавливания образованные под действием прилегания органов брюшной полости. Печень состоит из пяти долей: левая латеральная и медиальная, хвостовая, квадратная, правая латеральная и медиальная. На висцеральной поверхности выделяется воротная вена и желчный пузырь. Печеночные вырезки глубокие и доходят до входа в ворота печени (рис.1).
Рис. 1. Внешний вид печени: 1 - квадратная доля, 2 - левая медиальная, 3 - левая латеральная, 4 - правая латеральная, 5 - хвостатая, 6 - правая медиальная доля, 7 - желчный пузырь.
Определена абсолютная и относительная масса печени новорожденных (табл.1).
Таблица 1
Абсолютная и относительная масса печени
|
Генотип |
Масса тела, г |
Абсолютная масса печени, г |
Относительная масса печени |
|
Standart (+/+ +/+) |
10,43±1,4 |
0,64±0,05 |
0,07±0,009 |
|
Sapphire (a/a p/p) |
9,65±0,5 |
0,46±0,03 |
0,05±0,002 |
|
Lavender (a/a m/m) |
11,20±0,2 |
0,71±0,04 |
0,07±0,005 |
Из данных таблицы следует, что абсолютная масса печени по отношению к массе тела у новорожденных норок генотипа Standard (+/+ +/+) и Lavender (a/a m/m) имеет сходные значения – 6,34 и 6,14 %, у норок Sapphire (a/a p/p) показатель значительно меньше и составляет 4,77 %.
При гистологическом исследовании печени новорожденных норчат рисунок дольчатого строения не выражен, балочного строения сглажен. Хорошо просматриваются синусоиды, клетки Купфера. В синусоидах обнаруживаются кроветворные клетки: мегакариоциты (предшественники тромбоцитов) и эозинофильные нормобласты (предшественники эритроцитов) (рис.2, 3).
Рис. 2. Печень новорожденных норок. Окраска гематоксилин-эозином. Х 100. Генотип Lavender (a/a m/m). Мегакариоциты.
Рис. 3. Печень новорожденных норок. Окраска гематоксилин-эозином. Х 400. Генотип Lavender (a/a m/m). Эозинофильные нормобласты.
Выявляются очаги миелоидного роста. Под капсулой, в переваскулярном пространстве, в области триад имеются мононуклеарные инфильтраты (рис.4).
Рис. 4. Печень новорожденных норок. Генотип Standart (+/+ +/+).
Окраска гематоксилин-эозином. Х100. Переваскулярные инфильтраты.
Клетки эпителиального покрова слизистой оболочки желчных протоков находятся в состоянии усиленной пролиферации (рис 5).
Рис. 5. Печень новорожденных норок. Генотип Sapphire (a/a p/p). Пролиферация эпителия желчного протока. Окраска гематоксилин-эозином. Х400.
Гепатоциты у норок изучаемых генотипов многоугольной формы, преимущественно одноядерные (рис.6).
Рис. 6. Печень новорожденных норок. Гепатоциты. Генотип Lavender (a/am/m). Окраска гематоксилин-эозином. Х1000.
Площадь гепатоцитов у особей разных генотипов не превышала 47 мкм2, ядра – 16 мкм2, цитоплазмы – 32 мкм2 (табл. 2).
Таблица 2
Морфометрические показатели гепатоцитов
|
Генотип |
Площадь ядра, мкм2 |
Площадь гепатоцита, мкм2 |
Площадь цитоплазмы, мкм2 |
Я/Ц |
|
Standart (+/+ +/+) |
14,71±0,08 |
45,75±0,51 |
31,38±0,29 |
0,47±0,005 |
|
Sapphire (a/a p/p) |
14,73±0,05 |
46,63±0,20 |
31,95±0,57 |
0,46±0,003* |
|
Lavender (a/a m/m) |
15,28±0,2 |
46,36±0,70 |
31,06±0,57 |
0,49±0,01* |
Примечание: * - р<0,05
Ядерно-цитоплазматическое соотношение позволяет оценить функциональное состояние клеток, тканей, органов в процессе онтогенеза. У новорожденных норок исследуемых окрасочных генотипов, по данным таблицы, Я/Ц составлят в среднем 0,5 и указывает на достаточно большие размеры ядра гепатоцитов в данном возрасте у данного вида. Кроме того, величина Я/Ц может варьировать в зависимости от генотипической принадлежности особей.
Во многих литературных источниках указывается на изменение Я/Ц в зависимости от возраста. Так, у новорожденных ягнят (1-3 дня) оно составляет 0,23, у баранчиков 4-5-месячного возраста 0,17, баранов 3-5-летних 0.14 [5].
Таим образом, для новорожденных норчат характерно наличие в паренхиме печени мегакариоцитов и нормобластов, а также медуллярных очагов кроветворения, что говорит о том, что процессы кроветворения в печени в однодневном возрасте не заканчиваются. Наличие пролиферативных процессов в структурах печени (желчном протоке, периваскулярном и подкапсульном пространстве), высокое значение Я/Ц указывает на высокую интенсивность пластических и регенераторных процессов в печени новорожденных норок. Показатель Я/Ц зависит от многих факторов и очевидно может иметь вариативные значения в зависимости от видовой и генотипической принадлежности животного.
Литература:
- Андреева С.Д. Анатомофизиологическая характеристика и методы исследования печени у животных/ С.Д. Андреева, А.Н. Шестакова, А.Ф. Сапожников// Киров. – 2012. – 112 с.
- Курилкин В.В. Морфофункциональные показатели печени кур в постэмбриональном онтогенезе: Автореф. дис. канд. биол. наук. – М. – 2011.
- Ткачев Д.А. Постнатальный морфогенез кур кросса «Иза-Браун»: Автореф. дис. канд. биол. наук. – Ставрополь. – 2007.
- Тяпкина Е.В. Влияние биологически активных соединений на метаболические функции печени/ Е.В. Тяпкина, О.А. Фомин // Молодой ученый. – 2015. – №7 (87). – с. 1048-1051.
- Убашеев О.И. Анатомо-гистологическая характеристика печени бурятской грубошерстной овцы: Автореф. дис. канд. биол. наук. – Улан-Удэ. – 2003.
