Особенности микробиоценоза кишечника и системы иммунитета у детей больных вульгарными бородавками

The article presents the state of the intestine eubiosis and the immune system in children suffering from a warts, depending on the clinical form of the disease that are the main trigger of vulgar warts.

Key words: vulgar warts, pathogenesis, immune system, intestinal dysbiosis

Актуальность проблемы: Вирусные заболевания кожи в детском возрасте на сегодняшний день являются одним из распространенных и трудноизлечимых патологий, зачастую с рецидивами после лечения. Одним из этих заболеваний являются бородавки. Распространенность среди детей и молодых взрослых составляет 10 % [2]. Анализ наших исследований показал, что за последние 10 лет (2003–2014гг) доля детей с вирусными заболеваниями среди общепринятых дерматологических больных увеличилось, почти в 3 раза (1,2 % -2003г. до 3,5 % -2014г.). Если доля детей больных бородавками в 2003году составила всего 5,5 % от всех принятых больных с вирусными заболеваниями кожи, то в 2007г. составляло 23,5 %, а в 2014г. -53,3 %. Таким образом, за последние 10 лет обращаемость детей на прием дерматолога с бородавками возросла почти в 10 раз.

Передача вируса происходит при простом контакте, часто в тех местах, где на коже имеются царапины, ссадины или другие травмы. Чтобы инфекция проявилась, вирус должен вступить в контакт с больными клетками эпителия. Полная репликация вирусов происходит только в высокоспециализированных клетках многослойного плоского эпителия [1]. Поступление вируса (ВПЧ типов 2, 4, 7 -возбудители обыкновенных бородавок; ВПЧ типов 1, 4 -возбудители подошвенных бородавок) в организм еще не определяет возникновение клиники заболевания. В размножении вируса в тканях и в клиническом проявлении большое значение имеет состояние иммунной системы. В связи с этим, проявление бородавок можно считать индикатором снижения противовирусного иммунитета у данного больного. Поэтому монотерапия с применением прижигающих препаратов часто приводит к рецидиву заболевания.

Состояние иммунной системы организма во многом зависит от состояния нервной, эндокринной системы, а также от эубиотического состояния кишечника. Изменение в одном из этих звеньев неминуемо приводит к определенным сдвигам в функционировании защитной системы организма [5,6,7]

Изучению роли внутренних органов, в том числе желудочно-кишечных дисбалансов и системы иммунитета в патогенезе вульгарной бородавки посвящены немногочисленные работы [8,9,10]. Однако, эти исследования проведены в основном у взрослых по отдельным показателям, не учитывая взаимосвязь между этими системами. Вместе с тем, малоизвестно о количественном и структурном содержании наблюдаемых параллелей при нарушениях иммунного статуса и дисбактериоза кишечника у больных дерматозами, а у детей больных с вульгарными бородавками вообще не изучено.

Поэтому большой научный и практический интерес представляет изучение микробиоценоза кишечника, состояния иммунитета и взаимосвязь между этими системами, а также наличие взаимосвязей внутри каждой системы у детей больных вульгарными бородавками.

Материалы иметоды исследования: Под наблюдением находилось 44 детей больных вульгарными бородавками в возрасте от 3 до 18 лет включительно. Дети в возрасте 4–7 лет -7 (15,9 %), от 8 до 11лет — 15 (34,1 %), от 12 до 16 лет -22 (50,0 %). Как видно пик обращаемости больных вульгарными бородавками приходится на третью возрастную группу (12–18 лет) что соответствует данным литературы [2]. Больных вульгарной бородавкой было 27 (61,4 %), плоскими (юношеские) бородавками — 12 (27,2 %), ладонно-подошвенными бородавками -5 (11,4 %). Давность заболевания у 32 детей была до 1 года, у остальных 12 — более 1 года.

Микрофлору толстой кишки исследовали по классическим бактериологическим методом. Состояние кишечной микрофлоры и выраженность дисбиотических сдвигов оценивали по общепринятым критериям деления нарушений микробиоценоза кишечника на степени дисбактериоза.

Содержание Т-лимфоцитов периферической крови изучали моноклональным тестированием субпопуляций лимфоцитов периферической крови СD3, CD4, CD8, CD16, CD22 по мембранным маркерам с использованием антилимфоцитарных антител.

Результаты и обсуждение. При изучении микробиоценоза кишечника у всех детей, больных бородавками выявлены дисбиотические отклонения (у 30,8 % -II, у 41,7 % -III, у 17,6 %-IV, лишь у 9,9 % больных I-степень). Глубокие дисбиотические измениения III и IV степени в основном наблюдались при распространенных случаях (более 10 бородавок на коже) не зависимо от клинической формы заболевания (соответственно у 50 и 33 % больных). У больных 2–4 бородавками в основном наблюдался дисбиоз кишечника I–II -степени. Причем в 76 % случаев в прогрессирующей стадии заболевания выявлены выраженные изменения, соответствующие IV степени дисбактериоза.

Количественный и качественный состав микрофлоры кишечника у детей, больных бородавкой анализировали в зависимости от клинической формы бородавки. При вульгарной форме заболевания дисбиотические изменения носили более выраженный характер, чем при ладонно-подошвенной и плоской (Табл. 1).

Таблица 1

Показатели кишечной микрофлоры (на 1 гфекалий lg КОЕ/г) удетей, больных бородавкой, взависимости от клинической формы заболевания

Примечание: Одной звездочкой * отмечена достоверность различия и показателей, ровная Р< 0,05, двумя ** P< 0,001.

Как видно из данных, представленных в табл.1, при вульгарной форме бородавок чаще наблюдается уменьшение общего количества анаэробов, бифидобактерий и лактобактерий (Р<0,001), чем при плоской и ладонно-подошвенной (Р<0,05). Общее количество аэробов было значительно выше при всех наблюдаемых формах заболевания.

Нами выявлено уменьшение количества лактозопозитивных кишечных палочек, причем более выраженное у детей с вульгарной формой заболевания. У больных витилиго количество лактозонегативных кишечных палочек было в 2 раза больше, чем у здоровых детей. При ладонно-подошвенной и плоской бородавке это увеличение было статистически достоверно (соответственно Р<0,05, Р<0,001), но показатели были несколько ниже, чем при вульгарной форме бородавок. Аналогичное дисбиотическое изменение характерно для энтерококков, стафилококков (особенно золотистого и гемолизирующего) и общего количества грибов рода Кандида, особенно протея. Количество протея у больных с ладонно-подошвеннойбородавкой составляет 4,350,14 lg КОЕ/г, с плоской — 4,630,24 lg КОЕ/г, с вульгарной — 5,80,34 lg КОЕ/г, тогда как у здоровых детей — 1,30,2 lg КОЕ/г. Самое высокое (10⁶ и более) содержание протея наблюдалось у больных в прогрессирующей стадии заболевания независимо от формы витилиго.

Таким образом, результаты исследования свидетельствуют, что у всех детей, больных вульгарной бородавкой, в микрофлоре кишечника имеются дисбиотические изменения, проявляющиеся дефицитом анаэробов и увеличением содержания лактозонегативных кишечных палочек, грибов рода кандида, особенно протея. Эти дисбиотические изменение боле выражена у больных с множественными бородавками и при прогрессирующей стадии заболевания.

Состояние иммунной системы анализировали в зависимости от клинической формы заболевания (Табл 2).

Как видно из таблицы 2, у детей больных бородавкой общее количество Т-лимфоцитов (Р<0,001) уменьшается у всех обследуемых по сравнению с здоровыми детьми независимо от клинической формы заболевания. При сопоставлении показателей Т-лимфоцитов в сравниваемых группах больных разница между I-II и II-III группами оказалась статически достоверной (Р<0,05). Интересными оказались данные при изучении иммунорегуляторных субпопуляции Т-лимфоцитов. В результате исследования выявлено повышение количества Т-хелперов у всех больных вне зависимости от клинической формы заболевания. При этом самые высокие показатели отмечается у больных с вульгарной бородавкой (43,01,03 %). Сравнение показателей количества Т-хелперов между I-III (Р<0,05) особенно II-III группами, разница оказалась значимой (Р0,001). Нами установлено, что пул Т-супрессоров, в отличие от Т-хелперов, более чувствительный к нарушениям, происходящими в организме детей больных бородавкой. Так средний относительный показатель Т-супрессоров у детей больных бородавкой снижается более чем в 2 раза. При этом прослеживается взаимосвязь между количеством (распространенности) бородавок и глубиной дефицита Т-супрессоров. У детей больных с ладонно-подошвенной формой бородавок это показатель составил — 11,30,53 %, с вульгарной 8,70,92 % (Р0,001 соответственно) когда в контрольной группе 18,00,99. Сравнение показателей различных клинических форм бородавок показало достоверность различий, между I-III и II-III группами (Р0,05). Таким образом у детей больных с бородавками с увеличением количество высыпных элементов количество Т-супрессоров параллельно снижается.

Показатели системы иммунитета удетей больных бородавкой взависимости от клинической формы заболевания

Примечание: Звездочкой отмечена достоверность различий показателей (*Р<0,05, ** Р<0,001) по сравнению с данными здоровых детей. n-количество обследованных детей.

Интересные данные получены при изучении иммунорегуляторного индекса (ИРИ) CD4/CD8 у детей больных бородавкой. Изменение ИРИ у больных в определенной степени зависит от клинической формы заболевания. Как видно из таб. 2 наибольшая диспропорция между CD4/CD8 регистрируются у больных страдающих вульгарной формой бородавки. При этом коэффициент иммунорегуляции равен 4,94, в контроле 1,91 (Р0,001). Такая закономерность нарушения ИРИ характерна и для больных с ладонно-подошвенной и плоской формами бородавки, однако эти нарушения менее выражены чем, при вульгарной форме заболевания (2,530,07 %, 2,260.16 % при Р0,001, Р0,05 соответственно).

Средний уровень В-лимфоцитов у обследованных больных выше контроля. Следует отметить, что при этом самые высокие показатели констатированы у больных с вульгарной формой заболевания.

Определение гуморальных факторов В-системы иммунитета проводились путем оценки содержания в сыворотке крови иммуноглобулинов трех основных классов /А, М,G/. Как видно из таблицы 2, у детей больных бородавкой отмечается повышение (Р0,001) содержания иммуноглобулинов G и А независимо от клинической формы заболевания по сравнению с данными контрольной группы. Содержание иммуноглобулина М в периферической крови не отличались от показателей контрольной группы. При сопоставлении показателей иммуноглобулинов /А,М,G/ с различными клиническими формами бородавки достоверных различии (Р0,05) не выявлено. Наблюдается закономерность, что самые высокие показатели констатированы у детей, болеющих плоскими бородавками.

Таким образом изучение клеточного и гуморального иммунитета показало, что у детей больных бородавкой имеется нарушение как клеточного, так и гуморального звена иммунитета, выражающиеся в развитии Т- клеточного иммунодефицита за счет снижения субпопуляции Т-супрессоров, увеличения содержания Т-хелперов, В-лимфоцитов и увеличения количества IgA и IgG. Причем наиболее глубокие изменения с резким снижением Т-супрессоров, а также выраженным дисбалансом остальных показателей в основном наблюдается при вульгарной форме заболевания. Очевидно, что указанные изменения является предрасполагающим фоном для развития изучаемого заболевания, а наблюдаемая диспропорция между CD4/CD8 и в результате повышения ИРИ можно считать ответной иммунологической реакцией на внедрение вирусной инфекции на организм.

Приведенные результаты показали явно выраженную связь между проявлениями дисбактериоза кишечника и нарушениями в системе иммунитета у детей больных бородавками. Это подтверждается лабораторно выявляемыми признаками нарушений в кишечном микробиоценозе и иммунном статусе. Параллельно регистрируемые изменения микрофлоры кишечника и иммунного статуса затрагивают все звенья изучаемых систем, то есть анаэробную и аэробную микрофлору кишечника и клеточные и гуморальные звенья иммунитета.

ВЫВОДЫ:

1. У всех детей, больных бородавками, в микрофлоре кишечника имеются дисбиотические изменения, глубина которых зависит от клинической формы заболевания и от количество высыпных элементов.
2. У детей больных бородавками в периферической крови общее количество Т-лимфоцитов снижается, средний относительный показатель Т-хелперов повышается. Количество Т-супрессоров снижается, при этом чётко прослеживается взаимосвязь между степенью дисбиоза кишечника и глубиной дефицита Т-супрессоров. Наблюдаемая диспропорция Т-клеточного звена иммунитета, приводит к нарушению иммунорегуляторного индекса.
3. Выявленные дисбиотические изменение со стороны кишечника, системы иммунитета у детей больных бородавками диктует включат на комплексную терапию этих больных препаратов коррегирующих выявленных изменении со стороны изученных систем с цель повышения эффективности терапии и для вторичной профилактики данного заболевания.

Литература:

1. Хмельницкий, О. К. Цитологическая и гистологическая диагностика заболеваний шейки и тела матки / О. К. Хмельницкий. — СПб.: СОТИС, 2000. — 336 с.
2. The causal relation between papillomavirus and cervical cancer / F. X. Bosch [et al.] // Journal of clinical partology. — 2002. — Vol. 55, № 4. — P. 244–265.
3. Киселев, В. И. Вирусы папилломы человека в развитии рака шейки матки / В. И. Киселев. — М.: Димитрейд График Групп, 2004. — 180 с.
4. Хэбиф, Т. П. Кожные болезни: диагностика и лечение / Т. П. Хэбиф. — М.: МЕДпресс-информ, 2007. — С. 194–201.
5. Куваева И. Б., Ладодо К. С. Микроэкологические и иммунные нарушения у детей. Л: Медицина 1991: 240 с.
6. Лопатина Т. Х., Бляхер М. С. Иммуномодулирующее действие эубиотиков при разных видах патологических состояний, сопровождающихся дисбактериозом Тез.докл Всерос науч практ конф Москва 1996: 21–22.
7. Смолянская А. З., Гончарова Г. И. Современные аспекты дисбактериоза кишечника и его бактериологическая диагностика. Лабдело 1984;3:167–172.
8. Ярилин А. А. Основы иммунологии. М.: Медицина,1999. — 602 с.
9. Стефани Д. В., Виноградова Т. В., Ружицкая Е. А. и др. Иммунология. 2002; 23 (3): 164–6.
10. Дисбактериоз кишечника / А. И. Парфенов, Г. А. Осипов, П. О. Богомолов и др.-М., 2000.