Информативность анти-Hsp60 антител в диагностике инфекций

Вопрос информативности анти-Hsp60 антител у больных различными инфекциями в последнее время является актуальным в связи с тем, что выработка этих антител является неспецифической защитной реакцией против патогенов. Кроме того, анти-Hsp60 антитела могут способствовать формированию аутоиммунных состояний и различных деструктивных процессов. Это связано с тем, что микробная Hsp60, является сильным и потенциально опасным антигеном. Многочисленные инфекции, вызываемые бактериями, грибами, и микобактериями, могут запускать иммунную реакцию против микробного Hsp60 с образованием анти-Hsp60 антител [1]. Анти-Hsp60 антитела, также могут выявляться у здоровых субъектов (вероятно, вызванные Hsp60 от микробов нормальной флоры желудочно-кишечного тракта), что представляет собой ранний неспецифический защитный механизм против патогенов [15]. Имеющееся значительное сходство в первичной структуре микробных и человеческих Hsp60 способствует перекрестным антигенным взаимодействиям и формированию иммунных реакций против обоих белков [9].

Показано участие Анти-Hsp60 антитела в деструктивных процессах. Например, гуморальные иммунные реакции к бактериальным Hsp60 Chlamydophila pneumoniae (CP) и кишечной палочке, предположительно, вовлечены в процесс сосудистых эндотелиальных повреждений в патогенезе атеросклероза [6]. Также и Helicobacter Pylori [8] были отнесены к более высоким рискам развития коронарного атеросклероза, из-за высокой перекрестной реакции антимикробных Hsp60 антител с человеческим Hsp60. По тем же причинам, Hsp60 кишечной палочки также участвуют в патогенезе аутоиммунных ревматических заболеваний [14], патологий поджелудочной железы [13] и синдрома Шегрена [11].

Кроме того, увеличение уровня аутоантител против эндогенного Hsp60 предшествует развитию диабета у больных муковисцидозом [3]. Также Hsp60 могут играть роль в патогенезе аутоиммунных заболеваний щитовидной железы и надпочечников [5], было описано их участие в таких аутоиммунных заболеваниях как гломерулонефрит [7], юношеский дерматомиозит [2] и каплевидный псориаз [12].

CT-Hsp60 высвобождается из клеток, инфицированных Chlamydia trachomatis (CT), а анти-CT-Hsp60 антитела, вырабатываются иммунной системой хозяина. CT-Hsp60 обильно образуются при стойкой CT инфекции. В свою очередь, анти-CT-Hsp60 антитела могут участвовать в патогенезе таких заболеваний, как аутоиммунный артрит, рассеянный склероз, атеросклероз, васкулит, диабет, тиреоидит и другие. Кроме того, образующиеся иммунные комплексы анти-CT-Hsp60 антитела и CT-Hsp60 могут откладываться в клубочковой базальной мембране и способствовать развитию идиопатической формы гломерулонефрита [7].

Chlamydophila pneumoniae (CP) инфекции более распространены в человеческой популяции, чем Chlamydia trachomatis (СТ) инфекции [4]. Более половины всех взрослых имеют антитела к CP, поэтому, как следствие, можно ожидать, что антитела к CP Hsp60, которые наиболее вероятно, направлены против эпитопов схожих с СТ, должны быть обычным явлением.

Обычно в клинической лабораторной диагностике антитела к сHsp60 исследуют с целью выяснения стадии хламидийной инфекции, чтобы подобрать оптимально эффективную терапию. Для нас представляло интерес изучить присутствие анти-сHsp60 антител у больных с различными инфекциями, так как существует проблема определения истинной специфичности антител к сHsp60. Поскольку выявленные анти-Hsp60 при одной инфекции могут быть вызваны другими инфекциями.

Цель исследования: изучить выявляемость анти-Hsp60 антител у больных различными бактериальными и вирусными инфекциями.

Материал иметоды исследования. В лаборатории НИЛ АГМИ обследованы пациенты мужчины и женщины в возрасте от 20 до 70 лет на предмет диагностики следующих инфекций: Chlamydia trachomatis (193 пациента), Chlamydophila pneumoniae (164 пациента), Мycoplasma pneumoniae (157), Toxoplasma gondii (178), Вирус простого герпеса первого типа — ВПГ-1 (216), Вирус простого герпеса второго типа — ВПГ-2 (186), вирус Эпштейна-Барр — ВЭБ (147), Цитомегаловирус— ЦМВ (228). У всех обследуемых определяли IgG и IgM, а также анти-cHsp60 антитела. Исследовалась сыворотка крови методом ИФА с использованием стандартных наборов ЗАО «Вектор-Бест» (Россия). Результаты были статистически обработаны.

Результаты иих обсуждение.

Полученные результаты показали, что наиболее распространенными в обследованной популяции являются герперсвирусные инфекции, а именно IgG выявлены к ВПГ-1, ЦМВ и ВЭБ, соответственно 97,5±10,1 %; 95,8±11,3 % и 78,5±8,3 % (табл. 1). Более, чем у половины выявлены IgG к Chlamydophila pneumonia — 56,5±6,3 %, к Мycoplasma pneumoniae — у 38,3±4,2 %, а к Chlamydia trachomatis только в 31,2±2,9 % случаев.

Таблица 1

Выявляемость IgM- /IgG+ иIgM+/IgG- кисследованным инфекциям

При исследовании выявляемости IgM-/ IgG+ и IgM+/IgG- совместно с анти-cHsp60 установлено, что анти-cHsp60 антитела при одних и тех же инфекциях достоверно чаще встречаются в сочетании с IgM+, нежели с IgG+ (табл. 2). Обращает на себя внимание тот факт, что совместная выявляемость анти-cHsp60 антител с IgG и IgM в большей мере отмечается при внутриклеточных инфекциях (Chlamydia trachomatis и Chlamydophila pneumoniae, Мycoplasma pneumoniae).

Таблица 2

Выявляемостьанти-cHsp60 антител в сочетании с IgM- /IgG+ иIgM+/IgG-кисследованным инфекциям

Примечание: * — Р<0,05; ** — Р<0,01; ***Р<0,001.

Более высокие показатели анти-cHsp60 антител в сочетании с IgM можно объяснить тем, что в острой фазе инфекционного процесса (на это указывают IgM+) организм больного сам активно вырабатывает свои собственные белки теплового шока. На них вырабатываются антитела, с целью осуществлять контроль над процессом, и неспецифическое связывание с этими антителами при постановке реакции вполне вероятно.

Необходимо подчеркнуть, что речь идет именно о положительных реакциях на анти-cHsp60, т. е. к белкам теплового шока Chlamydia trachomatis. Так как в представленных данных, эти антитела выявлялись и у тех пациентов, у которых Chlamydia trachomatis не была выявлена, но присутствовали другие инфекции, возникает вопрос: «Какие же анти-cHsp60 были выявлены?». С учетом известного факта, что антитела к сHsp60 находят также и у здоровых людей, и их уровни могут изменяться в широких пределах [10], напрашивается вывод, что анти-cHsp60 антитела не являются специфическими и их выявление нельзя трактовать однозначно.

ВЫВОДЫ: анти-cHsp60 антитела выявляются как при хламидийных инфекциях, так и при герпесвирусных инфекциях, а также токсоплазмозе.

Выявляемые анти-cHsp60 антитела при хламидийной инфекции, вполне могут быть результатом перекрестных реакций на Hsp60 других микроорганизмов, что необходимо учитывать при интерпретации результатов исследований.

Литература:

1. Alard JE, Dueymes M, P Youinou, Jamin C. Modulation of endothelial cell damage of anti-Hsp60 autoantibodies in systemic autoimmune diseases// Autoimm Rev., 2007: 6: 438–443.
2. Elst EF, Klein M, de Jager W, S Kamphuis, Wedderburn LR et al. Hsp60 in inflamed muscle tissues is a task for regulating autoreactive T cells in patients with juvenile dermatomyositis.// Arthritis Rheum, 2008: 58: 547–555.
3. Jensen P, Johansen HK, Carmy P, Hoiby N, Cohen I. Autoantibodies to pancreatic Hsp60 precede the development of glucose tolerance in patients with cystic fibrosis.// J Autoimmun, 2001: 17: 165–172.
4. Kumar S, Hammerschlag MR Acute respiratory infections due to Lobzin: the current state of diagnostic methods//Clin Infect Dis, 2007:44:568–576.
5. Mallard K, Jones DB, Richmond J, M McGill, Foulis A. K. Expression of human heat shock protein 60 in the thyroid, pancreas, liver and adrenal autoimmune// J Autoimmun, 1996:9: 89–96.
6. Mayr M, Metzler B, S Kiechl, Willeit J, G Schett, Xu Q, G Wick Endothelial cytotoxicity mediated by serum antibodies to heat shock proteins from Escherichia coli and Lobzin: an immune response to heat shock proteins like A possible link between infection and atherosclerosis//Edition, 1999: 99: 1560–1566.
7. MC slot, Theunissen R, van Paassen P, Damoiseaux JG, Cohen Tervaert JW. Evaluation of antibodies against human HSP60 in patients with MPO-ANCA glomerulonephritis associated: cohort study// J autoimmune, 2006: 5: 3–4.
8. Okada T, Ayada K, S Usui, Yokota K, Cui J, et al. Antibodies against heat shock proteins 60 derived from Helicobacter pylori: a diagnostic value in cardiovascular disease.// J Autoimmun., 2007: 29: 106–115.
9. Pockley AG. Heat shock proteins as regulators of the immune response// Lancet, 2003: 362: 469–476.
10. Shamaei-Tousi A, Steptoe A, O'Donnell K, Palmen J, Stephens JW, et al. Plasma heat shock protein 60 and cardiovascular disease: the role of psychosocial, genetic, and biological factors// Cellular Stress Chaperon, 2007:12:384–392.
11. Shovman O, Y Scherer, Gilbourd B, R Gurley, Bocci EB et al. Low levels of heat shock proteins-60 and -65 autoantibodies in Sjogren's syndrome.// Isr J Med., 2005: 7: 778–780.
12. Son of NR, Park E.Yu., Kim CW, KH Kim, Kim KJ, et al. Comparison of expression of heat shock protein 60, Toll-like receptors 2 and 4, and T-cell receptor gammadelta in dental Plaque and teardrop-shaped psoriasis.// J Cutan Pathol., 2007: 34: 903–911.
13. Szebeni, Schloot N, V Kecskemeti, Hosszufalusi N, P Panczel et al. Th1 and Th2 cell response of type 1 diabetes patients and healthy people to human heat shock protein 60 peptides AA437-AA394 460 and-408// Inflamm Res, 2005: 54: 415–419.
14. Yokota SI, Hirata D, Minota S, T Higashiyama, Kurimoto M., et al. Autoantibodies against chaperonin CCT in human serum with rheumatic autoimmune diseases: comparison with other antibodies against Hsp60 family proteins.// Cellular stress. Chaperon, 2000: 5: 337–346.
15. Zügel U, Kaufmann SH (1999) Role of heat shock proteins in protection from and pathogenesis of infectious diseases. Zügel U, Kaufmann SH. The role of heat shock proteins in protecting against and the pathogenesis of infectious diseases.// Clin Microbiol Rev., 1999: 12: 19–39.