Сравнительный количественный анализ некоторых клеток ДНЭС и их взаимодействие в патогенезе меланозной пигментации десен



В слизистой оболочке десны ДНЭС представлена несколькими типами клеток: М, клетками Лангерганса и Меркеля, ТК. Однако, характер взаимоотношений, количественные и морфофункциональные особенности двух важных компонентов ДНЭС слизистой десны, а именно — М и ТК — при МПД, до настоящего времени не изучался. В результате проведенной сравнительной количественной морфометрии М и ТК при МПД, развившейся на фоне некоторых хронических воспалительных заболеваний пародонта, установлено достоверно значимое увеличение количественной плотности М с усилением их функциональной активности, а также снижение общего количества ТК с преобладанием дегранулированных форм по сравнению с двумя контрольными группами (здоровые лица и пациенты с воспалительными заболеваниями пародонта без МПД). При этом, предиктором возникновения меланозной пигментации десен является статистически достоверное уменьшение как общего количества ТК, так и их различных морфотипов. Анализ данных литературы и собственных наблюдений позволяют расширить представления о механизмах развития МПД, оптимизировать методы ранней диагностики и профилактики этой патологии, а также могут стать основой для разработки патогенетически обоснованной тактики лечения этой группы больных.

Ключевые слова: меланозная пигментация десен (МПД), хронический генерализованный катаральный гингивит (ХГКГ), хронический генерализованный пародонтит (ХГП), меланоциты (М), тучные клетки (ТК), диффузная нейроэндокринная система (ДНЭС)

Многочисленными исследованиями последних десятилетий установлено, что регуляция меланогенеза в коже и слизистых оболочках осуществляется путем взаимодействия как эндогенных (нейроэндокринная регуляция), так и экзогенных факторов (разнообразные физические, химические, механические раздражители, антигены бактерий, вирусов и т. д.) (11, 18, 21, 25). К тому же, в коже и слизистых оболочках было установлено и наличие местных регуляторов меланогенеза. К таким механизмам относят как взаимодействие клеток диффузной нейроэндокринной системы (ДНЭС) и их разнообразных метаболитов, так и воздействие на этот процесс клеток многослойного плоского эпителия и клеточного окружения стромы, в том числе антигенпрезентирующих клеток (6, 10, 20, 26, 27, 29, 30).

Известно, что в слизистой оболочке десны основными элементами ДНЭС являются меланоциты (М), клетки Лангерганса, клетки Меркеля, тучные клетки (ТК) стромы. Однако, сообщения о количественных исследованиях клеток ДНЭС в слизистой оболочке десны в норме и при различных воспалительных заболеваниях пародонта крайне редки (4, 7, 18, 22). В обзорах, монографиях и учебных пособиях нами также не были обнаружены сведения о количестве М в слизистой десны в норме, морфофункциональном состоянии других клеток ДНЭС и их участии в патогенезе меланозной пигментации десен (МПД).

В связи с вышеизложенным, целью нашего исследования явилось проведение сравнительного количественного анализа М и ТК слизистой оболочке десны в норме, при некоторых воспалительных заболеваниях пародонта и при МПД, возникшей на их фоне. На основании анализа литературы и результатов собственных наблюдений установить принципы взаимодействия М и ТК в патогенезе МПД.

Материалы иметоды.

Исследованы биоптаты пигментированной и непигментированной слизистой оболочке десны, полученные путем иссечения во время удаления неподлежащего лечению зуба. Группами контроля послужили фрагменты слизистой, взятые у лиц, страдающих гингивитом или пародонтитом без МПД, и у лиц без заболеваний полости рта. Полученный материал подвергали стандартной проводке. Для верификации гистологического диагноза и подсчета М срезы тканей окрашивали гематоксилином-эозином, по методу ван Гизона. Окраска гистопрепаратов толуидиновым синим и с помощью ШИК — реакции (Шифф — йодная кислота) была предпринята для подсчета и определения структурно-функциональной организации ТК.

Световая микроскопия и фоторегистрация осуществлялись с помощью микроскопа «Leica DM 1000». Морфометрия проводилась при увеличении ×400 (окуляр ×10, объектив ×40). Использовалась морфометрическая сетка Автандилова Г. Г. и Image-Pro® Plus система с прилагаемой к ней программой IPWIN32.exe for Windows, Weiss Imaging and Solutions GmbH. Количественные показатели М в последующем перерасчитывали на 1000 базальных эпителиоцитов и 10 мм (1 см) длины бального слоя. Количество и морфофункциональное состояние ТК в последующем перерасчитывали на единицу площади S = 1 мм². Статистическая обработка результатов морфометрических исследований проводилась с использованием t-теста Стьюдента (стандартный пакет программ Microsoft Office Excel, 2010). Для оценки значимости различий между группами использовали следующие приемы: определение средней, стандартной ошибки, вычисление t — критерия Стьюдента, дисперсионный анализ, с последующим попарным сравнением для вычисления вероятности ошибки (р). При р<0,05 различия между средними считались достоверными. При р<0,01 и ниже различия оценивали, как в высшей степени достоверные.

Собственные результаты.

Для проведения клинико-морфологического исследования были сформированы три группы больных:

I группа (основная) — пациенты с различной степенью МДП на фоне хронического генерализованного катарального гингивита (ХГКГ) или хронического генерализованного пародонтита (ХГП) (21 мужчина и 8 женщин);

II группа (контрольная) — пациенты с ХГКГ или ХГП без МПД (12 мужчин и 9 женщин);

III группа (контрольная) — здоровые лица (14 мужчин и 3 женщины).

Возраст пациентов колебался от 16 до 49 лет. Контингент обследованных включал в себя 19 больных ХГКГ, у 31 пациента был установлен ХГП различной степени тяжести.

Патоморфологический диагноз у пациентов I и II групп устанавливался на основании классических изменений в эпителии и собственной пластинке десны, описанных в многочисленных источниках литературы (2, 3, 9).

Количественная оценка М и их морфофункциональное состояние в слизистой оболочке десны определялись на основании нескольких критериев. Так, А.Хэм и Д. Кормак (15) в своем фундаментальном труде «Гистология» указывают, что клеточные тела М располагаются чуть ниже клеток базального слоя эпидермиса или между ними и до того, как клетки начнут вырабатывать меланин, они имеют в базальном слое вид так называемых светлых клеток. А меланин, накапливающийся в базальных кератиноцитах, располагается над ядром клетки, или, как указывают авторы — «с солнечной стороны». В. Л. Быков в своей книге «Гистология и эмбриология органов полости рта человека» так же отмечает, что при использовании стандартных методов окраски гистопрепаратов, тела М окрашиваются слабее, чем окружающие эпителиоциты, а их отростки не обнаруживаются (5).

Результаты морфометрического исследования количества М в перерасчете на 10 мм (1 см) длины базального слоя и на 1000 базальных эпителиоцитов при МДП и в двух контрольных группах представлены в таблице № 1.

Таблица 1

Количественные показатели морфометрического исследования Мв СОД внорме ипри различных воспалительных заболеваниях пародонта, протекающих си без МПД

Группы пациентов	Количество М на 10 мм длины базального слоя	Количество М на 1000 базальных эпителиоцитов
I группа	108,21±16,42	63,46±7,9
II группа	45,15±12,22	15,26±2,14
III группа	59,23±8,04	14,72±1,98
Коэффициент достоверности	Между I и II группами р<0,001*, между I и III группами р<0,001*, между II и III группами р<0,17**.	Между I и II, I и III группами p<0,001*, между II и III группами p˃0,5**.

Примечание: р<0,01 — различие в высшей степени достоверно*;

р˃0,05 — показатели недостоверны**.

Сравнительный анализ данных о количестве М в расчете на 10 мм (1 см) длины базального слоя показал высокую степень достоверности различий между I и II группами (р<0,001), а так же между I и III группами (р<0,001). Сравнение этих показателей во II и III группах не выявило статистически значимой разницы (р<0,17).

Идентичная закономерность была установлена и при сопоставлении данных о количестве М на 1000 базальных эпителиоцитов.

Патоморфологически во всех группах отмечалось неравномерное расположение М в базальном слое эпителия, довольно часто они обнаруживались на вершинах акантотических тяжей, а, иногда, даже в одном поле зрения при увеличении × 1000 можно было увидеть сразу два-три М. При иммерсионном исследовании во всех группах нами было отмечено неравномерное скопление гранул меланина, конденсирующегося преимущественно под ядрами М, причем более всего у края, направленного к эпителиальной базальной мембране. В базальных эпителиоцитах наибольшая конденсация гранул меланина также определялась под ядрами клеток со стороны базальной мембраны. В I группе пациентов пигментные гранулы отличались различным размером с преобладанием более крупнодисперсных форм и обнаруживались не только в М и в базальных клетках эпителия, но и в эпителиоцитах нижнего и частично среднего слоев эпителия.

На основании характеристик ТК, описанных во многих пособиях и монографиях мы идентифицировали 4 типа ТК (10, 13).Результаты морфометрического исследования ТК и их типов, а также данные сравнительного анализа представлены в таблице № 2.

Таблица 2

Количественные показатели морфометрического исследования ТК иих типов вСОД внорме ипри различных воспалительных заболеваниях пародонта, протекающих си без МПД

Группы пациентов	Количество ТК на 1мм².
	I типТК	II тип ТК	III тип ТК	IV тип ТК	Общее количество ТК
I группа	0,34±0,2	0,4±0,1	4,9±0,5	1,7±0,3	7,4±0,7
II группа	2,76±0,4	5,5±0,3	12,4±0,8	2,1±0,2	22,7±0,9
III группа	0,3±0,1	0,5±0,1	4,3±0,5	0	5,1±0,5
Коэффициент достоверности	между I и II, II и III группами р<0,001*, между I и III группами р<0,3**	между I и II, II и III группами р<0,001*, между I и III группами р<0,3**	между I и II, II и III группами р<0,001*, между I и III группами р<0,2**	между I и III, II и III группами р<0,001*, между I и II группами р<0,1**	между I, II и III группами р<0,001*

Примечание: р<0,01 — различие в высшей степени достоверно*;

р˃0,05 — показатели недостоверны**.

Как следует из таблицы 2, изменение как общего количества ТК на 1мм², так и их различных морфотипов имеет некоторую закономерность. Различие количественных показателей по общему числу ТК между всеми группами имеет высокую степень достоверности (р<0,001). У пациентов II группы по сравнению с I и III группами статистически достоверно преобладают ТК II и III типа (р<0,001). Тогда как для I группы наблюдений по сравнению со II группой, характерно статистически достоверное снижение как общего числа ТК (р<0,001), так и их различных типов с преобладанием дегранулированных форм. Однако, по сравнению с III (контрольной) группой по различным морфотипам ТК значимые отличия отсутствуют (р˃0,05). Следует отметить, что в I и II группах наблюдений по сравнению с нормой (III группа) ТК имели сравнительно большие размеры (более 7–10 мкм в длину) с метахроматичными гранулами и отличались многообразием форм: округлые, овальные, веретенообразные отростчатые и др. Причем, в гистопрепаратах этих групп нами был обнаружен феномен трансэпителиального диапедеза ТК с выбросом гранул в эпителий и собственную пластинку. При изучении современной научной литературы по пародонтологии мы не встретили сообщений о подобной миграции ТК. На серийных срезах в III контрольной группы трансэпителиальный диапедез ТК не выявлялся, ТК имели значительно меньшие размеры с орто- и метахроматичным окрашиванием гранул в цитоплазме.

Таким образом, нами установлено, что при достоверно значимом снижении общего количества ТК и их дегранулированных форм у пациентов, страдающих ХГКГ или ХГП, развивается МПД со статистически достоверным увеличением количества М и усилением их функциональной активности. В нормальной же слизистой оболочке десны общее количество ТК достоверно меньше, чем в I и II группах больных, и ТК отличаются небольшими размерами с преобладанием дегранулированных форм.

Обсуждение.

Патогенез МПД (меланопатии), возникшей на фоне ХГКГ и ХГП, до сих пор остается малоизученным. Ожидает своего решения и вопрос, представляет ли этот процесс собой новообразование или является следствием воспалительных заболеваний пародонта.

Анализ научной литературы указывает на повышенный интерес исследователей к изучению клеток ДНЭС, который обусловлен тем, что регуляторные пептиды и биогенные амины, синтезируемые этими клетками, контролируют течение физиологических процессов через нейрокринный, эндокринный или паракринный механизмы действия биологически активных веществ на соответствующие рецепторы клеток-мишеней (10, 12, 21, 27). Самыми представительными по количеству клеток ДНЭС являются слизистая оболочка желудочно-кишечного тракта, а также кожа, поэтому в настоящее время наиболее изучены эндокринные клетки именно этих отделов. В слизистой оболочке десны ДНЭС представлена несколькими типами клеток: М, клетками Лангерганса и Меркеля, ТК. Однако, характер взаимоотношений и морфофункциональные особенности двух важных компонентов ДНЭС слизистой десны — М и ТК — при различных видах патологии, в том числе и при МПД, не исследовался.

Основанием для проведения нашего исследования по изучению взаимодействия М и ТК при воспалительных заболеваниях пародонта, протекающих с и без МПД, послужили некоторые факты, установленные при изучении клеток системы ДНЭС при пигментных поражениях кожи и слизистых. Сложнейший механизм регуляции меланогенеза осуществляется путем взаимодействия множества эндогенных и экзогенных факторов (11, 18, 21, 25). К тому же, в коже и слизистых оболочках были обнаружены и местные регуляторы меланогенеза, вырабатываемые клетками ДНЭС, многослойного плоского эпителия и микроокружения. Один из продуктов секреции ТК — мелатонин, являясь в организме самым мощным антиоксидантом, наряду с многообразными биологическими эффектами, принимает участие в регуляции меланогенеза и пролиферации меланоцитов (16, 18, 21, 25, 29). В свою очередь, среди продуктов секреции М был обнаружен альфа-меланоцитстимулирующий гормон (α-МСГ), который тоже, обладая выраженными антиоксидантными свойствами (несколько меньшими по сравнению с мелатонином), оказывает стимулирующее действие на меланогенез и пролиферацию М. Причем, α-МСГ синтезируется как в самих М, так и в эпителиоцитах (20, 21, 26, 28, 29). Именно эта особенность: однонаправленность с одновременным антагонизмом этих двух нейрогормонов (мелатонина и α-МСГ), являющаяся характерным признаком для элементов ДНЭС, и послужила основанием для проведения сравнительного количественного анализа М и ТК в норме и при МПД, развившейся на фоне ХГКГ и ХГП.

Обнаруженное в нашем исследовании достоверное увеличение количества М при МПД, возникшей на фоне ХГКГ и ХГП, по сравнению с нормой и при воспалительных заболеваниях пародонта без меланоза, дают возможность констатировать, что МПД характеризуется увеличением количественной плотности М и усилением их функциональной активности. Гистохимически доказано, что наиболее важным регулятором в синтезе меланина является ферментативный процесс, катализируемый тирозиназой (тирозиназная активность). Изученные нами ранее показатели тирозиназной активности тоже указывали на усиление функциональной активности М, что было подтверждено статистически достоверным повышением меланогенетической активности меланосом, выделенных из пигментированной ткани десны, по сравнению с группами здоровых лиц и пациентов, страдающих ХГКГ и ХГП без МПД (8).

Данные количественной морфометрии М, полученные нами, не согласуются с сообщениями некоторых авторов, изучавших морфологию меланотических пятен на слизистой десны различной этиологии (17, 19, 23). Причем, необходимо отметить, что в этих публикациях оценка количества М при МПД проводилась субъективно, без применения количественных методов исследования. Гистологически нами также было установлено, что, в отличие от М и кератиноцитов кожи, в которых пигмент располагается «с солнечной стороны ядра» (15), в М и эпителиоцитах слизистой оболочки десны наибольшая конденсация пигмента наблюдается под ядрами клеток со стороны, направленной к базальной мембране эпителия.

Полифункциональность ТК и их участие в патогенезе воспаления с одновременным изменением структурно-функциональной организации этой популяции клеток является обоснованием для многочисленных исследований по изучению их роли в возникновении и течении воспалительных заболеваний пародонта (4, 7, 22). По мнению Булкиной Н. В. (4), Вулах Н. А. (7), проводивших иммуноморфологические исследования, соотношение между серотонин- и мелатонин-продуцирующими ТК в нормальной слизистой оболочке десны приблизительно одинаково и определяется как 1:1, тогда как при прогрессировании воспаления отмечается как снижение общего числа плотности ТК, так и уменьшение показателей серотонин-продуцирующих клеток. Нами установлено, что различие количественных показателей по общему числу ТК на 1мм² во всех сравниваемых группах имеет высокую степень достоверности (р<0,001), что согласуется и с данными литературы (4, 7, 22). По сравнению с I и III группами у пациентов II группы статистически достоверно увеличивается общее число ТК на 1мм² с преобладанием ТК II и III типа. Тогда как для I группы наблюдений по сравнению со II группой, характерно статистически достоверное снижение как общего числа ТК (р<0,001), так и их различных типов с преобладанием дегранулированных форм.

Небольшое несоответствие средних величин в разных источниках можно объяснить рядом объективных причин: различием в критериях дифференциальной диагностики, в методиках окраски. В нашем случае следует учесть также и влияние неблагоприятных факторов аридной зоны Туркменистана в виде жаркого и сухого климата, а также традиционного употребления населением горячего чая или, наоборот, охлажденных напитков. Эти особенности оказывают неблагоприятное воздействие как на весь организм в целом, снижая иммунитет (1, 11, 14), так и на слизистую оболочку полости рта, находящуюся в постоянном контакте с внешней средой.

В связи с отсутствием публикаций о количественном содержании различных типов ТК при МПД, развившейся на фоне ХГКГ и ХГП, сравнительный анализ результатов нашего исследования с мнениями других авторов невозможен.

Обобщая литературные данные и результаты собственного наблюдения нам представляется, что патогенез МПД на фоне ХГКГ и ХГП выглядит следующим образом. Принадлежность ТК и меланоцитов к единой системе клеток (APUD-серии) и наличие на их поверхности многочисленных гомологичных рецепторов обеспечивает процесс тесного взаимодействия между ними. Многочисленными исследователями подтверждена способность М, наряду с множеством различных пептидных гормонов, цитокинов, эйкозаноидов и компонентов внеклеточного матрикса секретировать α-MSG — меланоцитстимулирующий гормон (11, 18, 21, 27, 28, 29). Экспериментальные исследования, проведенные на моделях животных и культивировании эпителиальных клеток человека в бесклеточном матриксе, выявили, что и кератиноциты тоже обладают способностью вырабатывать α-MSG (21, 27, 29). А первые сообщения о том, что ТК, помимо участия в регуляции воспаления и регенерации тканей, вырабатываютмелатонин, являющийся одним из мощнейших эндогенных антиоксидантов и оказывающий подавляющее действие на меланогенез и пролиферацию М, появились в начале ХХI века (16, 18, 21, 25, 30).

При уменьшении общей популяции и различных морфотипов ТК (подтвержденное и в нашем сообщении), а, следовательно, и популяции мелатонин-продуцирующих ТК (4, 7, 22), снижаетсяуровень секретируемого ими мелатонина.

На фоне продолжающегося воспаления отсутствие антагонизма с мелатонином (продуктом секреции ТК) ведет к активации меланоцитов десны с усилением меланогенеза, так как меланопротеиды (в том числе и α-MSG), кроме пролиферотропных, иммунорегуляторных и прочих свойств, тоже обладают антиоксидантным эффектом (3, 10, 12, 22). Небезынтересно, что на заре изучения APUD — системы (ДНЭС), некоторые исследователи полагали, что клетки, входящие в неё, способны превращаться друг в друга (или взаимозаменять) в зависимости от воздействия внешней среды или потребности организма (24).Возможно, что при снижении численности ТК и уровня секретируемых ими нейрогормонов, более стрессоустойчивые меланоциты действительно вынуждены брать на себя выполнение части функций ТК.

Совокупность вышеуказанных морфологических и гистохимических изменений при ХГКГ и ХГП способствуют инициации меланогенеза, что, по-видимому, и является одним из звеньев патогенеза МПД. Для подтверждения этой гипотезы в дальнейшем нами планируется проведение комплексного исследования с оценкой функциональной активности всех элементов диффузной нейроэндокринной системы слизистой десны в норме и при МПД.

Результаты проведенного нами сравнительного количественного анализа и морфофункционального состояния М и ТК позволяют утверждать, что МПД, развившаяся на фоне ХГКГ и ХГП, характеризуется увеличением количественной плотности М и усилением их функциональной активности. При этом, предиктором возникновения МПД на фоне ХГКГ и ХГП является уменьшение как общего количества ТК, так и их различных морфотипов. Эти сведения позволяют расширить представления о механизмах развития МПД, оптимизировать методы ранней диагностики и профилактики этой патологии, а также могут стать основой для разработки патогенетически обоснованной тактики лечения этой группы больных.

Литература:

1. Аннадурдыев О., Косов А. Н. Неспецифические заболевания легких в условиях аридной зоны. // Ашхабад: Ылым. — 1993. — с. 7, 18.
2. Артюшкевич A. C., Трофимова Е. К., Латышева C. B. Клиническая периодонтология.// М.: Медпресс. — 2002. — 303 с.
3. Ботушанов П. Пародонтология. // Пловдив: Автоспектр. — 2000. — 333с.
4. Булкина Н. В., Лепилин А. В. Мелатонинпродуцирующие тучные клетки слизистой оболочки десны в норме и при генерализованном пародонтите.// Фундаментальные исследования (Материалы конференций). — 2004. — № 1. — С. 102.
5. Быков В. Л. Гистология и эмбриология органов полости рта человека.: Учебное пособие.// Изд. 2-ое испр. — СПб.: Специальная литература. — 1998. — 248 с.
6. Быков В. Л. Секреторные механизмы и секреторные продукты тучных клеток.// Морфология. — 1999. — Т. 115. — № 2. — С. 64–72.
7. Вулах Н. А. Роль мелатонин-, серотонинсекретирующих клеток десны и желудка в формировании воспалительных заболеваний пародонта при хроническом холецистите.// Автореф. на соиск. уч. ст. к.м.н. — Волгоград. — 2003.
8. Джумаев Х. Д. Биохимические аспекты меланоза слизистой оболочки десны.// Пародонтология. — 2012. –Том 17. — № 4 (65). — С. 45–48.
9. Заболевания пародонта./ Под ред. проф. Ореховой Л. Ю. // М.: Поли Медиа Пресс. — 2004. — С. 65–66, 68–74.
10. Кондрашевская М. В. Тучные клетки и гепарин — ключевые звенья в адаптивных и патологических процессах.// Вестн. РАМН. — 2010. — № 6. — С. 49–54.
11. Курбанов Х. К. Структура и функции меланосом.// Ашхабад: Ылым. — 1985. — 156 с.
12. Райхлин Н. Т., Кветной И. М., Осадчук М. А. APUD-система (общепатологические и онкорадиологические аспекты). // Обнинск. — 1993.– Т.1. — 127 с.
13. Серов В. В., Шехтер А. Б. Соединительная ткань.// М.: Медицина. — 1981. — 312 с.
14. Стржижовский А. Д., Дьяконов А. С., Белоусов В. В. Медико-биологические эффекты интенсивного УФ-излучения, глобальные последствия разрушения озонового слоя.// Космическая биология и авиакосмическая медицина. — 1991. — № 4. — С. 3–9.
15. Хэм А., Кормак Д. Гистология: Пер. с англ. — М.: Мир. — 1983. — Т. 4. — С. 53, 64–66, 94–95.
16. Cutando A., Aneiros-Fernández J., Aneiros-Cachaza J., Arias-Santiago S. Melatonin and cancer: current knowledge and its application to oral cavity tumours.// J. Oral Pathol. Med. — 2011. — Vol. 40. — № 8. — Р. 593–597.
17. Gartner L. P., Hiatt J. M. Color Textbook of Histology. 3th ed. // The McGraw-Hill Companies. — 2006. — 592 p.
18. Gómez-Moreno G., Guardia J., Ferrera M. J., Cutando A., Reiter R. J. Melatonin in diseases of the oral cavity.// Oral Dis. — 2010. — Vol. 16. — № 3. — Р. 242–247.
19. Hedin C. A., Axell T. Oral melanin pigmentation in 467 Thai and Malaysion people with special emphasis on smoker’s melanosis.// J. Oral Pathol. Med. — 1991. — Vol. 20. — № 1. — P. 8–12.
20. Hirobe T. Structure and function of melanocytes: Microscopic morphology and cell biology of mouse melanocytes in the epidermis and hair follicle. Invited Review.// Histol. Histopathol. — 1995. — № 10. — Р.223–237.
21. Imokawa G. Autocrine and paracrine regulation of melanocytes in human skin and in pigmentary disorders.// Pigment Cell Res. — 2004. — Vol. 17. — P. 96–110.
22. Kamal R., Dahiya P., Palaskar S., Shetty V. P. Comparative analysis of mast cell count in normal oral mucosa and oral pyogenic granuloma.// J Clin Exp Dent. — 2011. — Vol. 3. — № 1. — Р. 1–4.
23. Laugier P., Hunziker N. Pigmentation melanique lenticulaire, essentielle, de la muqueuse jugale et des Ievres.// Arch. Belg. Dermatol. Syphirol. — 1970. — Vol. 26. — P. 391–399.
24. Pearse A. G. E. The cytochemistry and ultrastructure of polypeptide hormone-producing cells of the APUD series and the embryologie, physiologic and pathologic implications of the concept.// J. Histochem. Cytochem. — 1969. — Vol. 17. — № 5. — P. 303–313.
25. Rizzi A., Comai S., Bertazzo A., Costa C. V., Allegri G., Traldi P. An investigation on the possible role of melatonin in melanogenesis.// J. Mass Spectrum. — 2006. — Vol. 41. — № 4. — Р. 517–526.
26. Slominski A., Paus R., Schadendorf D. Melanocytes as “sensory” and regulatory cells in the epidermis.// J. Theor. Biol. — 1993a. — Vol. 164. — P. 103–120.
27. Slonimski A., Wortsman J., Szczesnlewski A. Liquid chromatography mass spectrometry detection of corticotropin-releasing hormone and prooiomelanocortin-derived peptides in human skin.// J. Clin. Endocrin. Metab. — 2000. — Vol. 85. — P. 3575–3581.
28. Tsatmali М., Graham A., Szatkowski D. et al. Alpha-melanocyte-stimulating hormone modulates nitric oxide production in melanocytes.// J. Invest. Dermatol. — 2000. — Vol. 114. — P. 520–526.
29. Tsatmali М., Ancans J., Thody A. J. Melanocyte Function and Its Control by Melanocortin Peptides.// J. Histochemistry & Cytochemistry. — 2002. — Vol. 50. — № 2. — Р. 125–133.
30. Watanabe T., Hiltz M. E., Catania A., Lipton J. M. Inhibition of IL-1 beta-induced peripheral inflammation by peripheral and central administration of analogs of the neuropeptide alpha-MSH.// Brain. Res. Bull. — 1993. — Vol. 32. — P. 311–314.