Ферментативная активность нейтрофилов больных с осложненной и неосложненной ангиной

Воздействие неблагоприятных факторов, в том числе и антропогенных, на среду обитания людей изменило микробные биоценозы. Это привело к осложнению эпидемиологической ситуации, в связи усилением патогенных свойств сочленов микробных сообществ. С этими воздействиями внешней среды контактирует иммунная система человека, и в первую очередь нагрузка падает на лимфаденоидное кольцо ротоглотки . Небным миндалинам отводится в организме важная роль в формировании общего и местного иммунитета, который при хроническом тонзиллите закономерно нарушается [ 3].

Ангиной называется острое инфекционное общее заболевание организма, при котором видимые местные воспалительные явления выражены главным образом в лимфаденоидной части глотки. В профессиональной врачебной практике ангины называют тонзиллитами, или воспалением небных миндалин[1].

Тонзиллярная проблема, не смотря на свою давность, по-прежнему остается актуальной, что объясняется ее частотой и связью с другими органами и системами организма. Борьба с хронической очаговой инфекцией в миндалинах, вызывающей целый ряд местных и общих нарушений в состоянии и реактивности организма, является важной задачей практической медицины [2].

Во внутренней среде организма присутствуют клетки и молекулы, которые специализируются на защитной функции. Некоторые из них являются механизмами врожденного иммунитета, то есть присутствуют в организме еще до встречи с каким-либо болезнетворным микроорганизмом или чужеродной молекулой. Их называют факторами неспецифической защиты, так как они защищают организм от разных экзогенных и эндогенных агрессий, и их защитные функции лишены избирательности. [4]. Накопленный клинический опыт позволяет с высокой степенью вероятности прогнозировать изменения цитохимических показателей при различной патологии. Цитохимический анализ является высокоинформативным и относительно доступным методом изучения клетки [6].

Нами были проведены исследования метаболической активности нейтрофилов крови у больных с ангинами. На базе ГУЗ ОИКБ им. А.М. Ничоги было обследовано 65 больных с неосложненной лакунарной ангиной и 62 больных с лакунарной ангиной, осложненной перитонзиллярным абсцессом. Все больные находились в возрасте от 16 до 56 лет. Обследование проводилось в динамике: до и после лечения.  Больные получали стандартную терапию: антибиотики, дезинтоксикационную терапию, витаминотерапию, местную терапию.

У всех больных проводилось цитохимическое исследование ферментативной активности нейтрофилов. Нейтрофилы определяли в мазке из цельной крови. Определялась активность следующих групп ферментов:

1). Метаболические: сукцинатдегидрогеназа(СДГ), отражающая цикл Кребса; лактатдегидрогеназа (ЛДГ), отражающая анаэробный гликолиз; глюкозо-6-фос-фатдегид­рогеназа (Г-6-ФДГ), отражающая активность пентозо-фосфатного шунта.

2). Ферменты транспорта электронов кислорода: НАД и НАДФ –диафоразы по методике Р.П. Нарциссова.

3). Лизосомальные: альфанафтилацетатэстеразы и альфанафтилбутиратэстеразы по методике Вачштейна-Вольфа [7].

Оценку результатов цитохимических реакций проводили полуколичественным методом Kaplow. В основе этого метода лежит распределение всех клеточных элементов по группам в зависимости от интенсивности окраски и количества выявляемого в клетке цитохимически активного вещества. К нулевой группе относили клетки без гранул. В первую группу включали клетки низкой степени активности, содержащие единичные гранулы, или же клетки, в которых площадь окраски занимала до 25% цитоплазмы (степень "а"). Ко второй группе относили клетки средней степени активности, то есть те, цитоплазма которых была заполнена гранулами на 30-70% (степень "б"). К третьей группе относили клетки высокой степени активности, то есть заполненные гранулами на 70-100% независимо от того, контролировалось ядро или нет (степень "в"). Кроме того, к степени "в" относили клетки, из которых наблюдался выход гранул.

     Для определения среднего цитохимического показателя (СЦП) в мазке подсчитывали 100 клеток (нейтрофилов или моноцитов, в зависимости от вида мазка). При этом число клеток каждой из степеней умножали на номер степени, то есть СЦП определяли по формуле: СЦП = а + 2б +3в.

Активность метаболических ферментов в нейтрофилах больных неосложненной лакунарной ангиной до лечения была резко повышенной по сравнению с таковой в норме. Средний цитохимический показатель (СЦП) сукцинатдегидрогеназы (СДГ) более чем вдвое превышал норму (33,06± 0,02 у.е.) и формировался исключительно клетками высшей степени активности (степень «в»), число которых было сравнительно невысоко (11,03±0,01%).

Аналогичная картина наблюдалась в отношении лактатдегидрогеназы (ЛДГ) и глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы (Г-6-ФДГ), где СЦП реакции превышал нормальные показатели в три раза (СЦП_ЛДГ = 45,03± 0,06 у.е.; СЦП_Г-6ФДГ = 84,36± 0,06 у.е.). Все реагирующие клетки классифицировались как степень «в». Их количество составляло: ЛДГ - 15,01± 0,02% и Г-6-ФДГ - 28,12±0,02%.

После проведения курса стандартной терапии нормализации метаболизма нейтрофилов не происходило. Так, активность СДГ продолжала увеличиваться за счет появления большего числа клеток степени «в» (СЦП_СДГ = 38,10± 0,24 у.е.). Активность ЛДГ и Г-6-ФДГ оставалась на первоначальном уровне (СЦП_{ЛДГ =} 44,61± 0,09 у.е., СЦП_Г-6-ФДГ = 83,46± 0,12 у.е.). Все реагирующие клетки по-прежнему оставались высшей степени активности.

Активность НАД-диафоразы нейтрофилов больных данной группы до лечения была в два раза выше таковой в норме (СЦП_НАД= 24,63± 0,03 у.е.). Процент реагирующих клеток был невелик (8,21± 0,01%), при этом все клетки реагировали по высшей степени активности. В отношении НАДФ-диафоразы отмечалось резкое напряжение активности(СЦП_НАДФ=183,63±0,06 у.е.). Реакция наблюдалась почти в ста процентах клеток (91,21±0,02%), при этом все клетки были средней степени активности (степень «б»).

            После проведенного курса стандартной терапии активность НАД-диафоразы осталась на прежнем уровне, но произошла смена качественного состава реагирующих клеток. Количество реагирующих клеток несколько увеличилось (12,21± 0,02%), все они классифицировались как степень «б». Активность НАДФ-диафоразы имела ненамного уменьшилась (СЦП_НАДФ = 171,6± 0,46 у.е.), реагирующие клетки по-прежнему оставались средней степени активности.

Эстеразная активность нейтрофилов больных неосложненной лакунарной ангиной до лечения была резко повышена. Так, СЦП АЭ составил 52,64± 0,03 у.е., а СЦП БЭ - 217,18±0,02 у.е. Количество реагирующих клеток при АЭ было невелико. Средний цитохимический показатель АЭ до лечения формировался в равной доле клетками степеней «б» (11,06±0,02%) и «в» (10,12±0,02%).

Иная картина отмечалась в отношении активности БЭ. В данном случае количество реагирующих клеток составило 97,04± 0,01%. При этом были представлены клетки всех степеней реакции. Наибольшее количество клеток реагировали по типу «б» (60,11±0,02%). Клеток степени «в» было в два раза меньше (30,16±0,02%). Меньше всего отмечалось клеток степени «а» (7,20± 0,02%).

После проведенного курса стандартной терапии активность АЭ к нейтрофилах несколько уменьшилась (СЦП_АЭ = 44,30± 0,08у.е.). Происходило перераспределение качественного состава реагирующих клеток: все клетки классифицировались как степень «б».

На фоне стандартной терапии значительно снизилась активность БЭ в нейтрофилах данной группы больных. СЦП реакции составил 180,88± 0,04 у.е. Существенно поменялся качественный состав реагирующих клеток: все клетки классифицировались как степень «б».

В нейтрофилах больных лакунарной ангиной, осложненной абсцессом, активность метаболических ферментов до лечения была резко повышена. Отмечалось существенная активизация цикла Кребса (СЦП_СДГ=30,69±0,36 у.е.), анаэробного гликолиза (СЦП_ЛДГ= 81,09±0,06 у.е.) и пентозо-фосфатного шунта (СЦП_Г-6-ФДГ = 81,39± 0,02 у.е.). Средний цитохимический показатель всех трех реакций был сформирован исключительно клетками степени «в», которых было небольшое количество (СДГ -10,23±0,12%; ЛДГ-27,03±0,02%; Г-6-ФДГ-27,13±0,01%).

После проведенного курса стандартной терапии произошли значительные изменения активности дегидрогеназ в сторону снижения. Показатели активности СДГ, ЛДГ и Г-6-ФДГ в нейтрофилах не только достигали нормальных цифр, но были намного ниже таковых.

Так, активность СДГ после курса стандартной терапии в нейтрофилах данной группы больных была ниже нормальной в 2,1 раз, ЛДГ – в 1,8 раз, Г-6-ФДГ – в 2,04 раза. При этом все реагирующие клетки классифицировались как степень «а».

            Диафоразная активность в нейтрофилах больных лакунарной ангиной, осложненной абсцессом до лечения была резко повышена по сравнению с таковой в норме. Так, активность НАД-диафоразы составляла 96,33 ± 1,53у.е., а НАДФ-диафоразы - 196,89 ± 0,03 у.е., что, соответственно, в 7,48 и 2,22 раза выше нормальных показателей. Реагирующих клеток при НАД-диафоразе было немного (32,11±0,51%), при НАДФ-диафоразе –значительно больше (65,63±0,01%). Все реагирующие клетки классифицировались как степень «в». Клетки степеней «а» и «б» не встречались.

            После курса стандартной терапии наблюдалось резкое снижение активности диафораз ниже нормальной. СЦП НАД-диафоразы составил 5,61±0,21у.е., НАД-диафоразы - 62,13±1,01 у.е. Все реагирующие клетки классифицировались как степень «а».

            Аналогичная картина наблюдалась в отношении эстеразной активности нейтрофилов данной группы больных. До лечения отмечалось резкое напряжение активности обеих эстераз (СЦП_АЭ= 153,09±1,01 у.е.; СЦП_БЭ = 273,09±0,03 у.е.). В обоих случаях СЦП активности ферментов формировался клетками степени «в», которых при АЭ было 51,03±1,01%, при БЭ - 91,03±0,01%. После курса стандартной терапии активность обеих эстераз была резко снижена по сравнению с нормальными показателями (СЦП_АЭ=11,03±0,01 у.е., СЦП_БЭ=48,33±0,21 у.е.). Все реагирующие клетки классифицировались как степень «а».

Таким образом, из всего вышесказанного можно сделать следующие выводы:

1. В нейтрофилах у больных неосложненной лакунарной ангиной до лечения наблюдался «метаболический взрыв», повышение активности транспорта электронов кислорода и лизосомальной активности, которые не нормализовались после проведенного курса стандартной терапии:

2. В нейтрофилах больных лакунарной ангиной, осложненной паратонзиллярным абсцессом, до лечения наблюдалось повышение активности всего ферментативного спектра. После лечения активность всех исследуемых ферментов была угнетена;

3. Все количественные изменения ферментативной активности нейтрофилов сопровождались также и качественными изменениями, выражавшимися в перераспределении степеней клеточной активности.

Литература:

1. Богомильский, Михаил Рафаилович Детская оториноларингология : Учеб для студентов мед вузов / М Р Богомильский, В Р Чистякова Детская оториноларингология : М: ГЭОТАР-МЕД, 2002.

2.      Быкова В. П. Лимфоэпителиальные органы в системе местного иммунитета слизистых оболочек / В. П. Быкова //Арх. патологии. – 1995. – N 1. – С. 11-16.

3.      Быкова В. П. Миндалины лимфаденоидного глоточного кольца в системе мукозального иммунитета верхних дыхательных путей. В. П. Быкова / Проблема реабилитации в оториноларингологии: Тр. Всерос. конф., посвящённой 80-летию И. Б. Солдатова. Самарск. гос. мед. унив., 2003. - С. 344-345.

4. Фрейдлин И.С. Клетки иммунной системы./ И.С.Фрейдлин, А.А.Тотолян Тотолян А.А. -СПб.:«Наука», 2001.-390с.

5.      Черныш А. В. Современные представления о патогенезе острого тонзиллита /А. В. Черныш, В. Р. Гофман, Э. Р. Мелконян / Проблема реабилитации в оториноларингологии: Тр. Всерос. конф., посвящённой 80.летию И. Б. Солдатова. Самарск. гос. мед. унив., 2003. - С. 394-395