Сегодня, в период кардинального социально-экономического переустройства общества, по данным многих исследователей, наблюдается резкое ухудшение состояния здоровья детей и подростков[1]. В России число абсолютно здоровых детей снизилось до 10%, часто и длительно болеющие дети составляют 70-75%, а 15-20% имеют хронические заболевания. Дошкольный период является, по признанию специалистов всего мира, возрастом наиболее стремительного физического и психического развития ребенка, первоначального формирования физических и психических качеств, необходимых человеку в течение всей последующей жизни[4 ]. Частые длительные инфекционные заболевания могут привести к формированию серьезных нарушений в иммунной и эндокринной системе ребенка, вызвать сбой вегетативной регуляции как в подростковом, так и в старшем школьном возрасте. Известно, что организм человека – сложная иерархическая система, состоящая из клеточных структур, образующих целостный организм. В то же время отдельный клеточный пул или клетку можно рассматривать как самостоятельную открытую систему
[ 3]. Цитохимический анализ является высокоинформативным и относительно доступным методом изучения клетки. В литературе имеется масса работ, посвященных цитохимическим исследованиям в лимфоцитах при самых различных патологиях в педиатрии. Изучению цитохимической активности нейтрофилов уделяется гораздо меньше внимания. Между тем, эти клетки играют огромную роль в неспецифическом иммунитете [2].
Материалы и методы исследования. В условиях отделения ГУЗ ОДКБ им. Силищевой было обследовано 58 часто болеющих детей в возрасте от 10 месяцев до 16 лет. При анализе полученных результатов все больные дети распределились по следующим группам младшая возрастная группа(от 3 до 6 лет); средняя возрастная группа(от 7 до 11лет) и старшая возрастная группа(от 12 до 16 лет).
У всех детей проводилось цитохимическое исследование ферментативной активности нейтрофилов в мазке из цельной крови. В нейтрофилах исследовали следующие ферменты: сукцинатдегидрогеназа(СДГ), отражающая цикл Кребса; лактатдегидрогеназа (ЛДГ), отражающая анаэробный гликолиз; глюкозо-6-фос-фатдегидрогеназа (Г-6-ФДГ), отражающая активность пентозо-фосфатного шунта по методике Р.П. Нарциссова.
Оценку результатов цитохимических реакций проводили полуколичественным методом Kaplow. В основе этого метода лежит распределение всех клеточных элементов по группам в зависимости от интенсивности окраски и количества выявляемого в клетке цитохимически активного вещества. К нулевой группе относили клетки без гранул. В первую группу включали клетки низкой степени активности, содержащие единичные гранулы, или же клетки, в которых площадь окраски занимала до 25% цитоплазмы (степень "а"). Ко второй группе относили клетки средней степени активности, то есть те, цитоплазма которых была заполнена гранулами на 30-70% (степень "б"). К третьей группе относили клетки высокой степени активности, то есть заполненные гранулами на 70-100% независимо от того, контролировалось ядро или нет (степень "в"). Кроме того, к степени "в" относили клетки, из которых наблюдался выход гранул.
Для определения среднего цитохимического показателя (СЦП) в мазке подсчитывали 100 клеток. При этом число клеток каждой из степеней умножали на номер степени, то есть СЦП определяли по формуле: СЦП = а + 2б +3в.
Нормальные показатели данных ферментов приводятся по О.А.Мурзовой[ ].
Результаты и обсуждение. У часто болеющих детей (ЧБД) младшей группы при поступлении в стационар наблюдалось угнетение активности цикла Кребса и анаэробного гликолиза. Так, активность СДГ была ниже нормальных показателей в 3 раза (21,11±0,31у.е. при норме 60,06±0,12у.е.), ЛДГ – в 2.3 раз (31,01±0,02 у.е. при норме 72,02±0,02у.е.)., а активность Г-6-ФДГ – в 2.2 раза (37,01±0,02у.е. при норме 82,02±0,03у.е.).
После лечения активность СДГ практически не восстанавливалась (28,01±0,01у.е.), также, как активность ЛДГ и Г-6-ФДГ (ЛДГ= 39,05±0,02у.е., Г-6-ФДГ=42,15±0,03 у.е.).
Качественный состав реагирующих клеток в данной группе детей также отличался от нормального. Если в норме все реагирующие клетки при любой исследуемой реакции классифицировались по средней степени активности (степень «б»), то при поступлении он менялся на низшую степень активности (степень «а») и оставался таким же и после лечения.
В средней группе происходило существенное снижение активности всех исследуемых ферментов. Так, активность СДГ=12,01±0,22 у.е. при норме 30,02±0,02 у.е.; ЛДГ=21,01±0,42 у.е. при норме 48,02±0,02 у.е., Г-6-ФДГ = 19,01±0,02 у.е. при норме 44,02±0,01 у.е. Все реагирующие клетки классифицировались как степень «а» в отличие от нормы, где все реагирующие клетки были средней степени активности (степень «б»).
После лечения наблюдалась тенденция к восстановлению количественной активность пентозо-фосфатного шунта (22,02±0,11у.е.), анаэробного гликолиза (26,12±0,1 у.е.) и цикла Кребса (14,32±0,02 у.е.), не достигающая нормальных показателей. Качественных изменений не происходило. Все реагирующие клетки оставались низшей степени активности.
У ЧБД старшей группы (12-16 лет) при поступлении отмечалось угнетение всего исследуемого ферментативного спектра. Так, активность СДГ была снижена в 4,2 раза (4,24±0,04у.е. при норме 18,02±0,02 у.е.), ЛДГ – в 3,8 раза (6,03±0,06у.е. при норме 23,01±0,02 у.е.) и Г-6-ФДГ – в 6,7 раза (5,58±0,22 у.е. при норме 38,01±0,01 у.е.). Качественный состав реагирующих клеток до лечения при всех трех реакциях был средней степени активности.
После лечения активность исследуемых ферментов имела тенденцию к нормализации, не достигая нормальных показателей. Качественных изменений клеточной активности также не происходило.
Заключение. Таким образом, в дегидрогеназах нейтрофилов часто болеющих детей наблюдалось угнетение всех трех исследуемых ферментов (как количественные, так и качественные) не зависимо от возраста, не восстанавливающиеся после курса лечения.
Литература:
- Арина Г.А. Часто болеющие дети. Какие они? / Г.А. Арина, Н.А. Коваленко // Школа здоровья. 2005г. Т.2. №3. с.350
- Делян В. Ю. Взаимосвязь гуморального антибактериального иммунитета и кислородзависимого метаболизма нейтрофилов у детей раннего возраста с различными вариантами бронхитов /В.Ю.Делян, Н. А Сафина., О. И Пикуза, О. А. Платонова //Каз. мед. журнал.–2000.–LXXX1.–№1.–С.4–7.
- Коровина Н.А. Иммунокорректирующая терапия часто и длительно болеющих детей/ Н.А.Коровина, А.В.Чебукин, А.Л.Заплатников//Руководство для врачей. М, 1998.
- Острые респираторные заболевания у детей: лечение и профилактика: Научно-практическая программа Союза педиатров России, 2002. - С. 73.