Эксперименты, проводимые на животных, позволили сделать вывод, что приготовленный сок из листьев лопуха гладкосемянного не обладает острой и хронической токсичностью.
Ключевые слова: фитотерапия, лопух, фитопрепарат, фитоадаптоген, иммуномодулятор.
Актуальной задачей современной медицины является поиск новых лекарственных препаратов, влияющих на иммунную систему и предотвращающих развитие иммунодефицитных состояний [1]. К ним относятся широко используемые в народной медицине растительные адаптогены, которые оказывают комплексное влияние на организм, мобилизуя его иммунологические резервы, обладая при этом минимальным количеством побочных эффектов [2,3].
На территории Казахстана широкий ареал обитания имеет «лопух гладкосемянной», который в народе используется для лечения самых разных болезней (суставов, воспалений, заболеваний желудочно-кишечного тракта, опухолей и др.) [4]. Такой широкий спектр позитивных влияний на организм, по-видимому, являются следствием его иммуномодулирующих свойств [5].
Мир растений огромен и оказывает влияние на все без исключения сферы жизнедеятельности человека. Известный кардиолог Янушкевичус высказал мнение, с которым мы вполне согласны, о том, что: «Мы являемся свидетелями парадоксальной ситуации, когда хирургия становится все безопаснее, а терапия за счет развития в основном фармакотерапии,-все опаснее». В связи с этим понятен широкий интерес многих исследователей к фитотерапии, фитопрофилактике - вероятность осложнений, от применения которых значительно меньше.
Сопоставление эффективности многих растительных препаратов с сильнодействующими синтетическими препаратами - чаще не в пользу первых. Это нередко вызывает определенный скепсис к фитотерапии у практических врачей. В то же время многие растительные средства комплексного характера обладают целым рядом преимуществ, таких как низкая токсичность или отсутствие таковой, мягкость действия и возможность в связи с этим весьма длительного их использования без опасности побочных явлений. Все это настоятельно требует четкого определения роли и места фитотерапии в сложном комплексном процессе - лечении и профилактике современных заболеваний.
Лечение растениями – фитотерапия- это не панацея от всех болезней. Но и не только подспорье. Это равноправный компонент сложнейшего комплекса, каковым является современная терапия. В одних случаях - это действительно панацея (профилактика заболеваний, поддерживающая терапия), в других -подспорье (терапия острых периодов заболеваний), в третьих - она на равных с современным лечением. Предлагаемый нами фитопрепарат был получен из листьев «лопуха гладкосемянного», который широко распространен в Казахстане. Сбор листьев «лопуха гладкосемянного» проводили в мае-июне в степной части Ескельдинского района Алматинской области. Наиболее крупные, развитые листья промывали под проточной водой, измельчали с помощью мясорубки и под гидравлическим прессом выдавливали сок. К каждым 85 частям сока прибавляли по весу 15 частей экстрагента, смесь помещали в водяную баню при температуре 85-88°С. После того, как температура сока достигла 77-78°С, смесь выдерживали в течение ЗО минут, после чего емкость с соком охлаждали проточной холодной водой. Быстрое нагревание и охлаждение способствовало инактивации ферментов и свертыванию белковых веществ, а добавление экстрагента способствовалоденатурации последних. Полученный сок стабилизировали. РН сока составила 4,0, сухой остаток -4Д 7 + 0,26%.Схема технологического процесса производства фитопрепарата изображена на рисунке 1.
Рис. 1. Технологическая схема получения сока из листьев лопуха гладкосемянного
Примечание: ВР-вспомогательная работа: ТП-технологический процесс:УМО-упаковка, маркировка, оформление
В соответствии с требованиями по безопасности на новые биологические активные добавки к пищи по выявлению токсичности, были проведены опыты на белых беспородных крысах и мышах. Токсичность оценивали по методике Першина Г.Н. и LitchflerA.T.-Wilcoxon Р.А. Зондовое внутрижелудочное введение сока ЛГ проводили натощак, спустя 4 часа после кормления, последнее проводили не ранее чем через несколько часов после введения фитопрепарата. Исследование токсических свойств сока ЛГ осуществляли путем острой и хронической заправки.Определение острой токсичности предусматривало получение данныхо смертельных дозах и выявление наименьшей летальной дозы "для крыс имышей. Критериями оценки острой токсичности фитоадаптогена служили: общее состояние и поведение животных, ректальная термометрия в течениепервых 4-х часов после препарата и в последующие дни ежедневно;еженедельное взвешивание животных; учет павших животных и срокигибели; изучение макроскопических изменений внутренних органовпогибших животных. Для оценки состояния организма опытных животныхпод воздействием сока использовали методики по определению общегоанализа крови, биохимические определения кислой и щелочной фосфатазы,АЛТ и АСТ, а также комплексное изучение гистопатологическихизменений внутреннихорганов.Продолжительностьнаблюдений составила 30 суток (в течение 2-х недель после прекращения гибели животных). Исследования проводили на 10,20 и 30-е сутки от начала воздействия препарата.
Для определения острой токсичности сок листьев ЛГ вводили с помощью желудочного зонда из расчета максимально допустимых количеств жидкости. Для мышей эти дозы соответствовали- 0,8мл, для крыс -3,0 мл. Однократное внутрижелудочное введение фитопрепарата не вызывало гибели экспериментальных животных и каких-либо поведенческих изменений. Температура и масса тела крыс и мышей мало отличались от значений контрольных групп. Патологоанатомическое исследование внутренних органов животных, забитых в конце опыта, также не обнаруживало существенных отклонений от нормы.
Со стороны общего анализа крови, а также уровня АЛТ, АСТ, кислой и щелочной фосфатазы на 10, 20, 30 -сутки от момента введения сока «лопуха гладкосемянного» также не было установлено изменений (Таблицы 1 и 2).
Таблица 1
Форменные элементы крови экспериментальных крыс при исследовании токсичности сока «лопуха гладкосемянного»
|
Группа животных |
Сроки исследования (сутки) |
Эритроциты (млн/мкл) |
Лейкоциты (тыс/мкл) |
Лимфоциты(%) |
Нейтрофилы (%) |
|
1 опытная =10 |
10 |
6,1+0,20 |
6,9 + 0,45 |
78,3 + 0,38 |
20,9 + 4,9 |
|
2 опытная ~ 10 |
20 |
6,4 + 0,76 |
7,3 + 0,38 |
76,0 + 0,83 |
22,3 + 3,8 |
|
3 опытная = 10 |
30 |
6,2 + 0,57 |
6,8 + 0,40 |
71,8 + 0,70 |
23,1+8,8 |
|
Контрольная —30 |
|
6,7 + 0,44 |
6,6 + 0,78 |
73,1+0,82 |
27,0 + 4,3 |
Таблица 2
Активность биохимических показателей в плазме крови крыс
|
Группы животных |
Сроки исследования |
АЛТ (мкг/мл) |
АСТ (мкг/мл) |
Щелочная фосфатаза |
Кислая фосфатаза |
|
1 опытная — 10 |
10 |
23,6 + 2,6 |
61(9 + 4,9 |
85,7 + 7,0 |
8,1 + 1,6 ; |
|
2 опытная ™10 |
20 |
21,4 + 2,9 |
63,7 + 3,8 |
82,3 + 6,8 |
6,9+1,7: |
|
3 опытная = 10 |
30 |
23,9 + 2,4 |
60,8 + 4,0 |
84,3 + 5,8 |
8,1 + 1,5 |
|
Контрольная =30 |
|
22,3 + 2,7 |
62,6 + 4,8 |
85,8+7,9 |
7,9+1,6 |
При моделировании хронической токсичности сока листьев «лопуха гладкосемянного» экспериментальные животные получали фитопрепарат в течение 30-и суток из расчета 1/2 от максимально допустимого объема мыши-0,4 мл, крысы-1,5 мл. У каждого вида животных было по две группы ( по 30 голов в каждой контрольная и опытная группы). При изучении данных гематологических, биохимических, патологоанатомических тестов на протяжении всего эксперимента (30 суток от начала воздействия сока и еще 30 дней наблюдений после его окончания) не обнаруживалось существенных отличий от значений интактных контрольных групп при выборочном забое крыс и мышей на 7, 14, 30 и 60-е сутки. Клеточный состав периферической крови и уровень гемоглобина в процессе изучения хронической токсичности сока «лопуха гладкосемянного» также существенно не изменялся (Таблица 3).
Таблица 3
Клеточный состав периферической крови крыс в процессе изучения хронической токсичности сока лопуха гладкосемянного
|
Группы животных |
Сроки исследования (сутки) |
Эритроциты (млн/мкл) |
Лейкоциты (тыс/мкл) |
Лимфоциты (%) |
Нейтрофиллы (%) |
|
Опытная |
10 |
6,2+0,23 |
5,42+0,35 |
77,2+0,35 |
18,2+1,8 |
|
Опытная |
30 |
7,1+0,21 |
6,5+0,48 |
74,0+0,80 |
21,2+0,83 |
|
Контрольная |
10 |
7,3+0,35 |
6,3+1,5 |
81,2+0,87 |
18,3+1,55 |
|
Контрольная |
30 |
7,4+0,25 |
6,2+0,38 |
78,4+0,4 |
23,1+1,4 |
Как видно из представленных в таблице данных, наблюдение за экспериментальными животными в течение 30 дней от момента окончания моделирования хронической токсичности сока «лопуха гладкосемянного» в опытной группе, нами не было установлено каких-либо существенных отличии от контроля в содержании форменных элементов периферической крови.
Параллельно с общим анализом крови в эти же сроки наблюдения нами изучалась активность сывороточных препаратов аланинаминотрансферазы иаспартатаминотрансферазы. Полученные данные приведены в таблице 4.
Активность аланинаминотрансферазы и аспартатаминотраесферазы в плазме крови крыс (мкг/мл)
|
Группы животных |
Показатели |
1 0 сутки |
30 сутки |
|
Опытная |
АЛТ |
22,9 + 4,8 |
21,5 + 3,5 |
|
Опытная |
АСТ |
63,0 + 2,3 |
59,5 + 5,6. |
|
Контрольная |
АЛТ |
21,9 + 2,7 |
23,0 + 2,5 |
|
Контрольная |
АСТ |
63,5+5,1 |
61,9 + 5,2 |
Таким образом, на всех сроках обследования по активности аминотрансфераз плазмы нами не было установлено статистически значимых отклонений от нормативных показателей, что свидетельствовало об отсутствии гепатотоксического действия длительного приема сока из листьев «лопуха гладкосемянного» в группе экспериментальных животных. Эксперименты на животных позволили сделать вывод, что приготовленный сок из листьев «лопуха гладкосемянного» не обладает острой и хронической токсичностью.
Литература:
Конопля А.Н., Дрозд Г.А.,Кедровская Н.Н. Использование лекарственных препаратов растительного происхождения в качестве иммуномодуляторов.// Фармация 1998. № 2 стр. 17-19.
Ковалева Н.Г. Лечение растениями. М. Медицина 1972. стр.162
ГаммерманА.Ф., Кодаев Г.И., Яценко-Хмельский А.Б. Лекарственные растения.( Растение – целители).М. ВШ 1983. стр. 400.
Тажметов Б.М., Темирбеков А.М., Есенова Ж.Х. Антимутогенное влияние препаратов и листьев лопуха большого. // Вестник ЮГМА г. Шымкент 2000. стр. 42-43. №3
Шайхин В. Лупан – лопух культурный. //Наука и жизнь// 1997. стр. 106-107