Здоровье жвачных животных во многом зависит от функции рубца и жизнедеятельности его микрофлоры. Основной процесс пищеварения у данного вида происходит в рубце под влиянием ферментов микрофлоры – инфузорий, бактерий и др. Жизнедеятельность рубцовой микрофлоры поддерживается определенными условиями, соответствующим набором кормов и их качеством [3; 5; 9; 11; 12; 15; 18; 20; 21; 24; 26; 28; 29].
В рубце у животных из углеводов образуются летучие жирные кислоты (ЛЖК) – уксусная, пропионовая, масляная и др. Нормальное рубцовое пищеварение характеризуется определенным соотношением ЛЖК. Уксусная, масляная кислоты являются основными источниками жира молока, пропионовая кислота – глюкозы. Источником пропионовой кислоты у жвачных животных является молочная кислота, которая образуется из легкоусвояемых углеводов – сахаров, крахмала. В рубце она не накапливается, а трансформируется в пропионовую кислотую [6; 10; 13; 16; 19; 22; 27].
Изучение наличия и соотношения ЛЖК в рубцовом содержимом имеет важное значение, так как дает возможность оптимизировать рацион животных, профилактировать кетозы и кетоацидозы, а в конечном итоге, разработать оптимальные рационы для высокопродуктивных жвачных животных.
Существует ряд методов определения ЛЖК в рубцовом содержимом:
1. определение ЛЖК в аппарате Маркгама;
2. хроматографический анализ ЛЖК [1; 14].
С 1996 года начали производить серийные системы капиллярного электрофореза (КЭ) в СНГ. Этот метод с успехом применяется для анализа разнообразных веществ (неорганических и органических катионов и анионов, аминокислот, органических кислот (ЛЖК), витаминов, наркотиков, красителей, белков, углеводов, консервантов и т.д.). Система КЭ основана на разделении заряженных компонентов сложной смеси в кварцевом капилляре под действием приложенного электрического поля. Анализируемый объём вводят в кварцевый капилляр, предварительно заполненный подходящим буфером – электролитом. После подачи напряжения к концам капилляра компоненты смеси начинают двигаться с разной скоростью, зависящей, в первую очередь от заряда и массы и, соответственно, в разное время достигают зоны детектирования. Полученная последовательность пиков называется электрофореграммой [7; 23; 25].
На сегодняшний день выпускают следующие модификации приборов, относящиеся к системе КЭ: «Капель – 103Р», «Капель – 103РТ», «Капель – 104Т», «Капель – 104М», «Капель – 105», «Капель – 105М» [2; 4; 8; 17].
Целью настоящей работы была оценка возможности использования системы КЭ для определения ЛЖК в рубцовом содержимом жвачных животных.
Материал и методика. Для опыта использовали образцы рубцовой жидкости, взятых у взрослого высокопродуктивного крупного рогатого скота из учебно-опытного хозяйства «Кубань» г. Краснодара. Рубцовое содержимое брали при помощи резинового шланга длиной 220 см и наружным диаметром 30 мм, на 15–20-сантиметровом отрезке переднего конца которого имеются небольшие отверстия на случай закупорки основного входа.
Исследование проводили с использованием системы капиллярного электрофореза «Капель ‒ 103 РТ» (НПФ Люмэкс, Санкт-Петербург) с кварцевым капилляром диаметром 75 мкм и эффективной длиной 65 см. Для подготовки и восстановления поверхности капилляра проводили его последовательную промывку дистиллированной водой, 1М раствором соляной кислоты, 1М раствором гидрооксида натрия и затем ведущим электролитом. Работу проводили при температуре 20 °С, напряжение 17 кДж. В качестве ведущего электролита использовали раствор, состоящий из бензойной кислоты, дистиллированной воды, ЭДТА (Трилон Б), ЦТАБ (или ЦТА–ОН) и ДЭА. Прибор совместим с персональным компьютером, который позволяет обрабатывать полученные данные автоматически при помощи программы «МультиХром 1.5». Продолжительность исследования составляет 15‒20 минут.
Обсуждение результатов. Результаты исследования рубцового содержимого взрослого высокопродуктивного крупного рогатого скота из учебно-опытного хозяйства «Кубань» представлены в таблице 1.
Таблица 1
Соотношение ЛЖК в рубцовом содержимом крупного рогатого скота
|
ЛЖК |
Номер коровы |
Соотношение друг к другу в норме, % |
||
|
3015 |
3018 |
3020 |
||
|
Уксусная, % |
69 |
68 |
70 |
65-70 |
|
Пропионовая,% |
18 |
19 |
16 |
15-20 |
|
Масляная, % |
13 |
13 |
14 |
10-15 |
Результаты исследований показали, что в пробах рубцовой жидкости жвачных коров из ЛЖК методом КЭ были обнаружены уксусная, пропионовая и масляная кислоты, соотношение которых находится в пределах нормы.
Вывод. Система капиллярного электрофореза, благодаря своей экологичности и высокой эффективности может быть альтернативой уже существующим методам определения ЛЖК в рубцовом содержимом жвачных животных.
Литература:
1. Анализ зараженности зернового сырья микотоксинами / И. Н. Хмара, А. Г. Кощаев, А. В. Лунева, О. В. Кощаева // Сборник научных трудов Всероссийского научно-исследовательского института овцеводства и козоводства. - 2013. - Т. 3. - № 6. - С. 290-293.
2. Биотехнология кормовой добавки с целлюлозолитическими свойствами на основе Тrichoderma / А. Г. Кощаев, Г. В. Фисенко, О. В. Кощаева, И. Н. Хмара / Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. – Краснодар: КубГАУ, 2013. - № 09. - С. 1148.
3. Жолобова И. С. Влияние натрия гипохлорита на перепелок-несушек в период интенсивной яйцекладки / Жолобова И. С., Лунева А. В., Лысенко Ю. А. // Ветеринария. - 2014. - № 3. - С. 52-55.
4. Жолобова И. С. Лечение актиномикоза крупного рогатого скота натрия гипохлоритом / Жолобова И. С., Кощаев А. Г., Сазонова Н. В. // Сборник научных трудов Sworld. - 2009. - Т. 17. - № 2. - С. 38-39.
5. Жолобова И. С. Сохранение БАВ в сырье тыквенного происхождения / Жолобова И. С., Волкова С. А., Нестеренко Е. Е. // Молодой ученый. - 2015. - № 1 (81). - С. 156-158.
6. Жолобова И. С. Эффективность использования активированных растворов хлоридов при лечении собак с хирургическими заболеваниями / Жолобова И. С., Кощаев А. Г., Лунева А. В. / Труды Кубанского государственного аграрного университета. - 2012. - № 36. - С. 270-272.
7. Жолобова И. С. Эффективность применения натрия гипохлорита при силосовании кукурузы / И. С. Жолобова, С. А. Волкова, Е. Е. Нестеренко // Молодой ученый. - 2015. - № 3 (83). - С. 366-369.
8. Изучение биологически активных соединений в семенах тыквы различных сортов / С. Б. Хусид, А. И. Петенко, И. С. Жолобова, Е. Е. Нестеренко // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - 2014. - № 96. - С. 43-52.
9. Изучение биоразнообразия возбудителя пирикуляриоза риса молекулярно-генетическими методами / Мухина Ж. М., Волкова С. А., Коломиец Т. М., Тюрин В. В. // Труды Кубанского государственного аграрного университета. - 2008. - № 14. - С. 112-114.
10. Изучение биоразнообразия фитопатогенного гриба Мagnoporthe grisea (herbert) barr. с использованием методов молекулярного маркирования / Мухина Ж. М., Волкова С. А., Дубина Е. В., Супрун И. И., Ильницкая Е. Т., Мягких Ю. А., Коломиец Т. М., Коваленко Е. Д., Панкратова Л. Ф., Зеленский Г. Л., Тюрин В. В. // Методические рекомендации / Краснодар, 2007.
11. Использование отходов переработки растительного сырья для получения функциональных кормовых добавок / С. Б. Хусид, И. С. Жолобова, С. Н. Дмитриенко, Е. Е. Нестеренко // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - 2014. - № 98. - С. 706-731.
12. Кощаев А. Г. Технология получения витаминной кормовой добавки из отходов консервной промышленности / А. Г. Кощаев, С. Н. Николаенко, М. С. Чистоусова // Сборник научных трудов Sworld. - Одесса, 2008. - Т. 21. - № 1. - С. 25-27.
13. Кощаев А. Г. Функциональные кормовые добавки из каротинсодержащего растительного сырья для птицеводства / А. Г. Кощаев, С. А. Калюжный, О. В. Кощаева // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. – Краснодар: КубГАУ, 2013. - № 09. - С. 1167.
14. Кузьминова Б. В. Нормализация функции печени у крупного рогатого скота / Кузьминова Б. В., Жолобова И. С., Зафириди А. Г. // Ветеринарная патология. - 2006. - № 2. - С. 140-142.
15. Лысенко Ю. А. Изучение влияния пробиотической кормовой добавки «Промомикс С» на продуктивность и биобезопасность продукции птицеводства / Лысенко Ю. А., Лунева А. В. // Science Time. - 2014. - № 5 (5). - С. 112-122.
16. Лысенко Ю. А. Разработка бактериального концентрата на основе клеток Lactobacillus acidophilus / Лысенко Ю. А., Волкова С. А., Петрова В. В. // Молодой ученый. - 2015. - № 1 (81). - С. 80-82.
17. Марков С. А. Применение электроактивированных растворов хлоридов для обеззараживания кормов / С. А. Марков, С. Б. Хусид, И. С. Жолобова // Сборник научных трудов Sworld. - 2009. - Т. 17. - № 2. - С. 40-41.
18. Николаенко С. Н. Каротиноидный состав плодов тыквы / Николаенко С. Н., Волкова С. А., Николаенко В. И. // Молодой ученый. - 2015. - № 1 (81). - С. 166-168.
19. Николаенко С. Н. Пигментный комплекс плодов тыквы / Николаенко С. Н., Гамзина Т. Ю., Пахомова Е. Ю. // Сборник научных трудов Sworld. - 2009. - Т. 27. - № 1. - С. 7-10.
20. Пат. 2222593, Российская Федерация, МПК7 С 12 N 1/20, 1/14. Способ приготовления питательной среды для культивирования микроорганизмов / А. Г. Кощаев, И. В. Хмара, О. В. Кощаева, А. И. Петенко, Г. А. Плутахин, В. А. Ярошенко. Опубл. 06.05.2002.
21. Подбор оптимальной питательной среды для культивирования, концентрирования и высушивания клеток Lactobacillus acidophilus / Лысенко Ю. А., Лунева А. В., Волкова С. А., Николаенко С. Н., Петрова В. В. // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - 2014. - № 102. - С. 689-699.
22. Получение функциональной кормовой добавки на основе бентонитовых глин и каротинсодержащего сырья / И. С. Жолобова, С. Б. Хусид, М. П. Семененко, Ю. А. Лопатина // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. – Краснодар: КубГАУ, 2014. - № 96. - С. 117-128.
23. Семененко М. П. Влияние функциональной кормовой добавки на рост и развитие цыплят-бройлеров / Семененко М. П., Жолобова И. С., Лымарь Т. А. // Труды Кубанского государственного аграрного университета. - 2013. - № 45. - С. 181-182.
24. Тузов И. Н. Особенности роста и развития животных голштинской породы скота в условиях Краснодарского края / Тузов И. Н., Калошина М. Н., Николаенко С. Н. // Труды Кубанского государственного аграрного университета. - 2012. - № 35. - С. 349-353.
25. Физиолого-биохимическое обоснование применения бактериальной добавки Бацелл в составе растительных комбикормов на птице /А. Г. Кощаев, С. Н. Николаенко, Г. В. Фисенко, А. В. Саакян // Сборник научных трудов Всероссийского научно-исследовательского института овцеводства и козоводства. - 2009. - Т. 2. - № 2-2. - С. 140-143.
26. Фракционирование сока люцерны для получения кормовых добавок / А. Г. Кощаев, Г. А. Плутахин, О. В. Кощаева, С. А. Калюжный // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. – Краснодар: КубГАУ, 2013. –№ 10. - С. 917.
27. Хусид С. Б. Получение функциональной кормовой добавки на основе рисовой мучки и бентонита / С. Б. Хусид, Я. П. Донсков // Политематический сетевой электронный научный журнал Кубанского государственного аграрного университета. - 2014. - № 101. - С. 655-664.
28. Хусид С. Б. Разработка кормовой добавки на основе бентонита и отходов переработки риса / Хусид С. Б., Волкова С. А., Донсков Я. П. // Молодой ученый. - 2015. - № 1 (81). - С. 135-138.
29. Ширина А. А. Фармакологическое обоснование применения пробиотика «Промомикс С» / А. А. Ширина, А. И. Петенко, Ю. А. Лысенко, А. В. Лунева // Птицеводство. – 2013. - № 9. - С. 35‒39.
