Оценка состояния клеточного иммунитета у женщин с бактериальным вагинозом

Известно, что Т-лимфоциты являются основными клетками-эффектора­ми и регуляторами иммунного ответа. Они участвуют в поддержании хронического воспаления в стенке сосудов, совместно с эндотелиальными клетками запускают цитокиновый каскад, являясь как продуцентами цитокинов, так и их мишенями [1, 2].

Изменение количества Т-клеток и соотношения их основных субпопуляций является значимыми показателями состояния иммунитета. В связи с этим, в собственных исследованиях изучали показатели абсолютного и относительного содержания Т-лимфоцитов периферической крови у женщин с бактериальным вагинозом.

Иммунологический статус определяли у 132 женщин с бактериальным вагинозом (1-я группа) и 40 лиц группы сравнения (2-я группа). Для оценки состояния клеточного звена иммунитета использовали следующие параметры: содержание лейкоцитов и общего пула лимфоцитов крови, относительное и абсолютное содержание зрелых Т-лимфоцитов (СD3⁺), Т-хелперов/индукторов (СD4⁺), Т-супрессоров/цитотоксических лимфоцитов (СD8⁺-клетки). Также рассчитывали иммунорегуляторный индекс – отношение содержания СD4⁺-клеток к СD8⁺-клеткам.

Исследования показали, что количество лейкоцитов, палочкоядерных, сегментоядерных нейтрофилов и лимфоцитов в периферической крови у женщин с БВ по сравнению со здоровыми лицами было статистически не достоверным (p>0,05) (табл. 1).

Таблица 1

Содержание лейкоцитов и лимфоцитов в периферической крови у женщин с бактериальным вагинозом

Изучение субпопуляционного состава лимфоцитов у обследованных женщин показало следующее (табл. 2).

Таблица 2

Абсолютное содержание субпопуляций Т-лимфоцитов

Как следует из таблицы, содержание CD4⁺ лимфоцитов, CD8⁺ лимфоцитов и соотношение CD4/CD8 субпопуляций Т-лимфоцитов (иммунорегуляторный индекс) у женщин 1-й группы статистически не различалось.

Таким образом, содержание субпопуляций Т-лимфоцитов при бактериальном вагинозе и у здоровых не имело достоверных различий.

Функциональную активность Т-лимфоцитов на первом этапе определяли в реакциях торможения миграции лейкоцитов периферической крови (РТМЛ) и бластной трансформации лимфоцитов (РБТЛ) у пациентов с различной длительностью заболевания.

Вследствие неспецифической стимуляции конканавалином А (Кон А) лимфоциты секретируют лимфокины, в том числе фактор торможения миграции лейкоцитов. В связи с этим, по степени торможения миграции лейкоцитов судят о лимфокинпродуцирующей способности лимфоцитов, а, следовательно, и об их функциональной активности. Усиление миграции лейкоцитов свидетельствует об иммунодефицитном состоянии организма, снижение процента миграции лейкоцитов по сравнению с нормой указывает на активацию Т-лимфоцитов.

При учете результатов посева по интенсивности роста выделенных культур всех обследованных делили на четыре группы:

1 группа – очень скудный рост – рост только на жидких питательных средах; на плотной питательной среде рост отсутствует.

2 группа – скудный рост – на плотной питательной среде рост до 10 колоний микроорганизмов определенного вида.

3 группа – умеренный рост, на плотной питательной среде рост от 10 до 100 колоний.

4 группа – обильный рост, на плотной питательной среде рост более 100 колоний

Результаты РТМЛ у женщин с БВ в зависимости от интенсивности роста выделенных культур представлены в табл. 3.

Таблица 3

Результаты РТМЛ у женщин с БВ в зависимости от интенсивности роста выделенных культур (%)

Примечание: * – показатель достоверности между женщинами с БВ и здоровыми (р<0,05)

Как видно из таблицы у женщин с БВ в ответ на действие Кон А показатели РТМЛ у обследованных при очень скудном (1 группа) и скудном росте (2 группа) вагинальной микрофлоры по сравнению со здоровыми не имели статистически значимых различий. Достоверное повышение показателей РТМЛ, демонстрирующее значительное усиление торможения миграции лейкоцитов обнаружены при умеренном росте (3 группа) и обильном росте (4 группа) микроорганизмов. Следовательно, показано изменение активности лимфоцитов, выявляемое в РТМЛ при увеличении интенсивности роста вагинальной микрофлоры.

Далее, с целью изучения функциональной активности пула Т-лимфоцитов использовали феномен бластной трансформации под влиянием неспецифической стимуляции митогеном конканавалином А (Кон-А). Степень функциональной активности лимфоцитов оценивали по их способности переходить в лимфобласты.

Результаты исследований РБТЛ свидетельствовали о статистически значимых отклонениях этого показателя у женщин третьей и четвертой групп по сравнению со здоровыми (табл. 4). Проведенные исследования выявили общую для всех обследованных тенденцию к повышению трансформации лимфоцитов в бластные формы женщин с нарушениями вагинального микробиоценоза.

Следовательно, у больных БВ отмечалось снижение функциональной способности лимфоцитов периферической крови к трансформации в бласты под воздействием лимфоцитарного митогена.

Таблица 4

Результаты РБТЛ у женщин с БВ в зависимости от интенсивности роста выделенных культур (%)

Примечание: * – показатель достоверности между женщинами с БВ и здоровыми (р<0,05)

В общей характеристике эффекторных реакций клеточного иммунитета особое место занимают лимфоциты, обладающие повреждающим действием в культуре ткани. Установлено, что цитотоксический эффект проявлялся у большинства женщин с БВ, однако изменение его показателей происходило по разному. Наибольших значений показатели цитопатогенной активности лимфоцитов было выявлено у обследованных с умеренным и обильном росте вагинальной микрофлоры на питательных средах (0,54 ± 0,02 и 0,48 ± 0,06 соответственно; у здоровых 0,74 ± 0,09; р<0,05) (рис. 1). У женщин с незначительными изменениями микробиоценоза влагалища (очень скудный и скудный рост) повышение цитотоксического индекса не наблюдалось или было статистически не достоверно (0,7 ± 0,3 и 0,7 ± 0,2 соответственно).

* – показатель достоверности между больными с БВ и здоровыми

Рис. 1. Изменение цитотоксического индекса у женщин с БВ

Изучение аффинности Е-рецепторов Т-лимфоцитов показало, что количество всех фракций Еа-РОК было снижено (табл. 5), однако статистически достоверным оно было лишь у средне- и высокоаффинных Еа-РОК (р<0,05).

Таблица 5

Изменение аффинности Т-лимфоцитов у женщин с БВ (×10⁹/л)

Примечание: * – показатель достоверности между женщинами с БВ и здоровыми (р<0,05)

Из таблицы видно, что снижение показателей аффинности Т₁-клеток было недостоверным (р>0,05), статистической значимости эти показатели достигали лишь у Т₂ и Т₃-лимфоцитов (р<0,05) по сравнению со здоровыми (рис. 2).

Рис. 2. Снижение аффинности Еа-РОК Т-лимфоцитов у женщин с БВ

Это проявлялось в том, что показатели индекса аффинности лимфоцитов имели статистически достоверные различия у женщин с БВ и здоровых только в случае среднеаффинных Т₂-клеток и высокоаффинных Т₃-клеток.

Изучение эффекторных реакций клеточного иммунитета выявило высокую цитотоксическую активность лимфоцитов на фибробласты периферической крови женщин с БВ. Максимальное увеличение цитопатогенной активности лимфоцитов было выявлено у обследованных с умеренным и обильном росте вагинальной микрофлоры на питательных средах (0,54 ± 0,02 и 0,48 ± 0,06 соответственно; р<0,05). Показатели аффинности лимфоцитов периферической крови у всех обследованных с БВ также изменялись, содержания средне- и высокоаффинных Т-лимфоцитов было достоверно снижено, в то время, как количество низкоаффинных Т-лимфоцитов достоверно не изменялось.

Литература:

1. Сепиашвили Р.И. Естественные киллеры и биогенные амины: паракринная регуляция в иммунной системе/ Р.И. Сепиашвили, И.П. Баламасова // Российский физиологический журнал им. И.М. Сеченова. – 2005. – №91. – С. 927 – 941.
2. Хаитов Р.М. Физиология иммунной системы / Р.М. Хаитов // М.: ВИНИТИ РАН. – 2001. – 224 с.