В статье автор пытается осуществить сохранение представителей семейства лилий путем размножения методом in vitro на примере вьющихся лилий.
Воспроизведение редких и исчезающих растений с помощью биотехнологических методов является в настоящее время единственным способом сохранения разнообразия растений.По этой причине если определить благоприятные условия для совершенствования и размножения вьющихся лилий в культуре in vitro, то можно рекомендовать этот метод как способ сохранения.
Проведение дезинфекционных работ для достижения асептических условий
Сначала протираем рабочее место внутри ламинарного бокса 70 % спиртом. Для извлечения меристемы готовят бинокулярное увеличительное стекло. За 10–12 часов до начала работы обрабатываем внутреннюю часть ламинарного бокса бактерицидной ультрафиолетовой лампой.
Приготовление питательной среды Мурасиге Скуга
Питательная среда содержит фитогормоны роста, микро и макроэлементы, глюкозу и агар-агар. Агар-агар, полисахарид из морских водорослей, используется для приготовления плотной питательной среды. Ауксины: ИУК-β индолил-3-уксусная кислота. Цитокины представляют собой кинетин-6-фурфуриламинопурин, зеатин, NH-дифенилмочевину, 6-БАП-6-бензиламинопурин, 2-изопентениладенин.
Способ приготовления растительного материала и выделения экспланта
Стерилизованные экспланты растений используют для культивирования тканей и клеток растений, микроклональной репродукции, получения каллусных и опухолевых клеток, изучения гормональной регуляции.
Отделение эксплантата от побега. Мы заранее выращиваем семена в чистых, стерильных условиях и получаем ростки. От семени в стерильной чашке Петри в ламинарном боксе вырезали стерильный побег длиной 1 см. Посадку помещаем в отдельную стерильную чашку Петри, вырезаем эксплант размером 2–3 мм с помощью стерильного пинцета и скальпеля № 11 и переносим на питательную среду в зависимости от цели выращивания.
Способ посадки и выращивания экспланта в среде с агаром
Если срез органа растения, то есть эксплантат (эксплантат), посадить в подходящую питательную среду, через некоторое время клетки в ее составе начинают делиться и расти. В результате образуется каллусовая ткань.
Изменяя состав питательной среды, можно получить растение-регенерант из случайно растущих тканей за счет свойства тотипотентности растения.
Вначале каллюс разрастается, а после того, как масса достигает некоторого переходного периода, переходит к морфогенезу. Если в питательной среде присутствуют фитогормоны (в том числе ауксины), клетки дедифференцируются и превращаются в каллусные клетки. Первым этапом дедифференцировки специализированной клетки является восстановление способности клетки к делению.Рост клеток напрямую связан с внутренними и внешними воздействиями К внутренним воздействиям относятся: фонд распространения; длина клетки; общее состояние клетки, входящей в цикл; число отдельных клеточных делений. К внешним факторам относятся: состав питательной среды, уровень рН, количество кислорода, температура, плотность высаженных клеток и тканей и др.
3.7 Адаптация растений в лаборатории
Листообразование кудрявой лилии при размножении in vitro происходит быстро, по нашим исследованиям на это уходит 7–15 дней. Во всех пробирках мы видим хорошо созревшие листья. Через месяц длина листьев в некоторых пробирках достигала 10 см.
Заключение
Клональное микроразмножение является одним из наиболее удобных и эффективных методов культивирования. Метод клонального микроразмножения имеет ряд преимуществ по сравнению с обычным вегетативным размножением. Они:
— возможность быстрого воспроизведения, то есть очень высокий коэффициент воспроизведения.
— ускорить процесс сортировки.
— восстановление растений от вирусов и патогенных микроорганизмов.
— экономичность.
В настоящее время проблема сохранения разнообразия растений является одной из актуальных в связи с ослаблением экологической обстановки, усилением неблагоприятного воздействия человечества на окружающую среду, нерациональным использованием природных ресурсов. Редкость многих видов в природе и сокращение их биоразнообразия приводят к их полному исчезновению как вида. А микроклональное размножение является одним из наиболее удобных и эффективных методов культивирования. Преимущества данного метода:
— очень высокий коэффициент размножения.
— ускоренный процесс сортировки.
— защита растений от вирусов и патогенных микроорганизмов.
— экономичность,
А также ряд других.
Литература:
- Калинин, Ф. Л. Технология микроклонального размножения растений / Ф. Л. Калинин, Г. П. Кушнир, В. В. Сарнацкая. — Киев: Наукова Умка, 1992. — 232 c.
- Калинин, Ф. Л. Основы биотехнологии растений / Ф. Л. Калинин, Г. П. Кушнир, В. В. Сарнацкая. — Нижний Новгород:, 2012. — 49 c. — Текст: непосредственный.
- Мельников, А. А. Микроклональное размножение растений / А. А. Мельников. — Текст: электронный // scienceforum: [сайт]. — URL: https://scienceforum.ru/2017/article/2017038389
- Шильникова, В. К. Практикум по микробиологии / В. К. Шильникова, Г. И. Переверзева. — Москва: Колос, 1993. — 26 c.
- Митушев А. С. Методы клонального микроразмножения / С. А. Митушев. — М.: Агропромиздат, 1995. — 128 с.
